申请/专利权人：中国农业科学院棉花研究所;南京农业大学

申请日：2020-10-13

公开（公告）日：2021-01-05

公开（公告）号：CN112174973A

主分类号：C07D493/04(20060101)

分类号：C07D493/04(20060101);A01N43/90(20060101);A01P3/00(20060101);A01P21/00(20060101)

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的驳回

法律状态：2022.09.30#发明专利申请公布后的驳回;2021.01.22#实质审查的生效;2021.01.05#公开

摘要：本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及分离棉花内生真菌CEF‑082的抑制棉花黄萎病菌的活性组分的方法。CEF‑082代谢粗提物对棉花黄萎病菌具有抑菌活性。CEF‑082代谢粗提物中分离到的chaetoviridinA能显著抑制大丽轮枝菌微菌核的萌发，促进大丽轮枝菌细胞内H2O2和NO积累，并且使细胞坏死，抑制菌丝生长。降解细胞壁，使大丽轮枝菌对逆境的敏感性增强，还能增强棉花植株对黄萎病菌的防御反应。

主权项：1.一种分离棉花内生真菌CEF-082的抑制棉花黄萎病菌的活性组分的方法，其特征在于，包括以下步骤：棉花内生真菌CEF-082的发酵液经过乙酸乙酯等体积萃取，旋转蒸干，得到粗提物；将粗提物与硅胶拌匀，做柱子填料，干法上样，进行梯度洗脱，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇，洗脱比例分别为100:0、100:1、100:2、100:4、100:8、100:16、100:32，然后用纯甲醇冲洗柱子，TLC进行合并，共得到了5个组分，为1-5号，1号洗脱的比例是100:0和100:1，2号的洗脱比例是100:1，3号的洗脱比例是100:2，4号的洗脱比例是100:2，5号的洗脱比例是100:2和100:4，其中用vv为100:0和100:1的CH2Cl2和MeOH的混合物洗脱，得到一个组分1号，2.6g，活性最强。然后将该组分用vv为15:1、10:1、5:1，、3:1的石油醚和乙酸乙酯的混合物进行硅胶柱色谱洗脱，TLC进行合并，得到7个组分，F-1洗脱比例是15:1，F-2洗脱比例是10:1，F-3洗脱比例是10:1，F-4洗脱比例是5:1，F-5洗脱比例主要是3:1，F-6和F-7是有纯乙醇洗脱的，F-2对大丽轮枝菌有较好的活性；组分F-2在活性追踪方法下分离纯化后得到纯化合物，化学式为C23H25ClO6。

全文数据：

权利要求：

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