申请/专利权人：华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司

申请日：2021-07-21

公开（公告）日：2021-11-12

公开（公告）号：CN113637647A

主分类号：C12N7/01(20060101)

分类号：C12N7/01(20060101);C12N15/12(20060101);C12N15/40(20060101);C12N15/86(20060101)

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2021.11.30#实质审查的生效;2021.11.12#公开

摘要：本发明公开了一种pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒及其制备方法，包括：设计与合成引物：构建得到复制子质粒pSFVCs‑sp6‑EGFP；将复制子质粒pSFVCs‑sp6‑EGFP进行体外转录；再将其体外转录的mRNA共电转入BHK细胞中，得到pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒。相应的，本发明在pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒基础上构建了去除病毒衣壳蛋白结构的复制子质粒pSFV‑sp6‑EGFP，进而制备出病毒样颗粒pSFV‑EGFP。实施本发明，所述病毒样颗粒pSFV‑EGFP增强了EGFP蛋白的表达，成功建立了一种以塞姆利基森林病毒为载体高效表达其它重要外源蛋白的平台，为后续RNA疫苗研制奠定实验基础。

主权项：1.一种pSFVCs-EGFP病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，包括：1设计与合成引物，所述引物包括设计引物Cs-EGFP-F和Cs-EGFP-R，以及菌液鉴定引物EGFP-鉴定-F和EGFP-鉴定-R：2以EGFP-C1为模板，以Cs-EGFP-F，Cs-EGFP-R为引物扩增Cs-EGFP片段，然后经过酶切、同源重组、重组产物转化和鉴定、提取质粒、酶切鉴定及测序，构建得到复制子质粒pSFVCs-sp6-EGFP；3将所述复制子质粒pSFVCs-sp6-EGFP和辅助质粒SFV-heleper进行体外转录；4将所述复制子质粒pSFVCs-sp6-EGFP及辅助质粒SFV-heleper体外转录的mRNA共电转入BHK细胞中，得到pSFVCs-EGFP病毒样颗粒。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 pSFVCs-EGFP和pSFV-EGFP病毒样颗粒及其制备方法、应用

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