申请/专利权人：天津农学院

申请日：2020-10-21

公开（公告）日：2022-05-03

公开（公告）号：CN112457409B

主分类号：C07K19/00

分类号：C07K19/00;C12N9/36;C12N15/70;A61K38/17;A61K38/47;A61K47/55;A61K39/00;A61P31/04

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.05.03#授权;2021.03.26#实质审查的生效;2021.03.09#公开

摘要：本发明涉及一种hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白，构建步骤如下：⑴根据TLN‑58基因碱基序列GI：AP02750和hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10，优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ‑TLN‑58基因SEQIDNO.9；⑵PCR扩增hLYZ‑TLN‑58基因；⑶重组原核表达载体pGEX‑4T‑1‑hLYZ‑TLN‑58表达纯化获得hLYZ‑TLN‑58基因融合蛋白。本发明构建的重组原核质粒所表达的蛋白对实验菌株表现出良好的抑菌活性，为临床预防和治疗细菌性疾病提供了新的治疗思路和实验依据。

主权项：1.一种hLYZ-TLN-58基因融合蛋白，其特征在于：构建步骤如下：⑴根据TLN-58基因碱基序列GI：AP02750和hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10，优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ-TLN-58基因SEQIDNO.9；⑵PCR扩增hLYZ-TLN-58基因：包括以hLYZ-TLN-58-FSEQIDNO.5和hLYZ-TLN-58-RSEQIDNO.6为引物，扩增hLYZ-TLN-58基因；⑶重组原核表达载体pGEX-4T-1-hLYZ-TLN-58表达纯化获得hLYZ-TLN-58基因融合蛋白；具体步骤如下：⑴根据TLN-58基因碱基序列GI：AP02750优化得到在小鼠体内高效表达的TLN-58基因SEQIDNO.7；根据hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ基因SEQIDNO.8；根据TLN-58基因碱基序列GI：AP02750和hLYZ基因标准序列GI：NC_000012.10优化得到在小鼠体内高效表达的hLYZ-TLN-58基因SEQIDNO.9；⑵PCR扩增TLN-58基因和hLYZ基因：以hLYZ-FSEQIDNO.1和hLYZ-RSEQIDNO.2为引物，扩增hLYZ基因；以TLN-58-FSEQIDNO.3和TLN-58-RSEQIDNO.4为引物，扩增TLN-58基因；以hLYZ-TLN-58-FSEQIDNO.5和hLYZ-TLN-58-RSEQIDNO.6为引物，扩增hLYZ-TLN-58基因；⑶将获得的目的基因克隆到pMD-18-T载体中，线性化重组穿梭载体后构建重组原核表达载体，并用其转化感受态XL-10Gold，构建了包含上述目的基因的重组原核表达载体pGEX-4T-1-hLYZ-TLN-58，纯化蛋白制备多克隆抗体，即得hLYZ-TLN-58基因融合蛋白；所述hLYZ-TLN-58基因融合蛋白具备抗菌活性。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津农学院 一种TLN-58和hLYZ基因融合蛋白及抗菌活性和应用

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