申请/专利权人：四川新绿色药业科技发展有限公司

申请日：2020-12-30

公开（公告）日：2022-05-03

公开（公告）号：CN112578055B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.05.03#授权;2021.04.16#实质审查的生效;2021.03.30#公开

摘要：本发明公开了藕节及藕节炭对照提取物的制备工艺及其质量控制方法，取藕节分别炮制而得藕节及藕节炭饮片，加水煎煮两次，一煎加9倍水，浸泡30分钟，煮沸，保持微沸煎煮30分钟，过滤，立即冷却至室温；二煎加7倍水，煮沸，保持微沸煎煮20分钟，过滤，合并水煎液，冷却至室温，真空冷冻干燥，即得藕节及藕节炭对照提取物。通过合理控制煎煮次数、加水量、煎煮时间等，能有效控制收粉率及其有效成分总多酚的含量，保证了藕节及藕节炭对照提取物成分的稳定性，且工艺运行稳定。同时，建立了藕节及藕节炭对照提取物的特征图谱及其总多酚含量的测定方法，可实现藕节及藕节炭对照提取物制备工艺稳定性和可靠性的质量控制。

主权项：1.藕节对照提取物制备工艺的质量控制方法，其特征在于：包括构建藕节对照提取物的特征图谱以及对藕节对照提取物中总多酚的含量进行测定，特征图谱构建步骤如下：A.分别制备藕节对照药材的参照物溶液和藕节对照提取物的供试品溶液，参照物溶液的制备包括：取藕节对照药材，加70%甲醇10ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得，供试品溶液的制备包括：取藕节炮制而得的藕节饮片，加水煎煮两次，一煎加9倍水，浸泡30分钟，煮沸，保持微沸煎煮30分钟，过滤，冷却至室温；二煎加7倍水，煮沸，保持微沸煎煮20分钟，过滤，合并水煎液，冷却至室温，真空冷冻干燥，即得藕节对照提取物，取藕节对照提取物，加入70%甲醇25ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；B.分别取参照物溶液和供试品溶液，按高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，在流速为1.0mlmin，柱温为35℃，检测波长为275nm下进行测定，得到对应的特征图谱，其中，梯度脱洗满足以下条件：0～60min，流动相A：5%→90%，流动相B：95%→10%；C.以参照物溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建藕节对照提取物的特征图谱，所述共有峰包括7个特征峰，总多酚含量的测定步骤如下：A.分别制备没食子酸对照品溶液、标准曲线和藕节对照提取物的供试品溶液，没食子酸对照品溶液的制备包括：取没食子酸对照品，加水制成每1ml含50μg的溶液，即得，标准曲线的制备包括：分别取没食子酸对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，均加入1ml磷钼钨酸试液，再分別加水11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，供试品溶液的制备包括：取所述藕节对照提取物，加水80ml，超声处理30分钟，放冷，用水稀释至100ml，摇匀，静置，滤过，即得；B.精密量取供试品溶液2ml，照标准曲线的制备方法，测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量，计算得藕节对照提取物中总多酚的含量，所述总多酚的含量限度为1.5～3.5%。

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