申请/专利权人：佛山科学技术学院

申请日：2020-12-31

公开（公告）日：2023-01-24

公开（公告）号：CN112649269B

主分类号：G01N1/30

分类号：G01N1/30;G01N33/531

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.01.24#授权;2021.04.30#实质审查的生效;2021.04.13#公开

摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种用于Bax和Bcl‑2的免疫组织化学染色方法，包括：采用胰酶‑EDTA溶液进行抗原修复。本发明对传统的抗原修复进行改进，通过采用胰酶‑EDTA溶液，使得免疫组化结果图染色背景浅，抗原暴露位点完整，定位准确，非特异性染色少，显色准确，强度表达强弱分明，易于统计表达率和表达强度，同时一抗与抗原结合更加紧密，不易洗脱，可减少相关实验步骤和成本。

主权项：1.一种免疫组织化学染色方法，其特征在于，所述染色方法中，包括：采用胰酶-EDTA溶液进行抗原修复；所述染色方法，具体包括如下步骤：S1、取动物组织制成蜡块后切片，再脱蜡，水化处理；S2、将所述S1得到的切片置于0.1~0.15体积％的胰酶-EDTA溶液中进行抗原修复；S3、将所述S2得到的切片滴加1~3体积％的过氧化氢溶液进行孵育；S4、往所述S3得到的切片加入一抗进行孵育；S5、往所述S4得到的切片加入二抗进行孵育；S6、对所述S5得到的切片进行DAB染色；S7、将所述S6得到的切片依次采用苏木素复染、盐酸酒精分化、稀碳酸锂水溶液返蓝操作；S8、将所述S7得到的切片进行脱水，使透明，封片；所述S1具体为：取动物组织制成蜡块后切片，然后将得到的切片在常温下置于二甲苯中浸泡10~12分钟，更换二甲苯后再重复浸泡两次；采用100％，95％，90％，80％，70％体积百分比的乙醇，浓度由高到低依次浸泡3~5分钟，其后蒸馏水浸泡3~5分钟，PBS清洗1~3次，每次3~6分钟；所述S2具体为：将所述S1得到的切片置于0.1~0.15体积％的胰酶-EDTA溶液中，于35~40℃下孵育20~40分钟，其后PBS清洗1~3次，每次3~6分钟；所述S4具体为：往所述S3得到的切片滴加一抗，于35~40℃下孵育20~40分钟，再于1~5℃下孵育10~15小时，然后于室温下静置10~20分钟，其后PBS清洗1~3次，每次3~6分钟；所述一抗为Bax或Bcl-2；所述S5具体为：往所述S4得到的切片滴加二抗，于20~30℃下孵育20~40分钟，其后PBS清洗1~3次，每次3~6分钟；所述二抗为山羊抗小鼠IgG或山羊抗兔IgG。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 佛山科学技术学院 一种用于Bax和Bcl-2的免疫组织化学染色方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD