申请/专利权人：上海伯杰医疗科技股份有限公司北京分公司;上海伯杰医疗科技股份有限公司

申请日：2021-09-18

公开（公告）日：2023-03-21

公开（公告）号：CN113718045B

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/01

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.03.21#授权;2021.12.17#实质审查的生效;2021.11.30#公开

摘要：本发明涉及微生物检测技术领域，具体涉及用于检测4种鲍特菌和特异性检测百日咳鲍特菌的DNA片段、引物、探针和试剂盒及应用。本发明提供用于百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌、霍氏鲍特菌和支气管败血鲍特菌检测的DNA片段和特异性引物，能够实现对4种鲍特菌的测序分型检测，具有较高的特异性和准确性。本发明还提供用于特异性检测百日咳鲍特菌的引物探针组，能够利用多重荧光PCR法特异性检测百日咳鲍特菌，具有较高的灵敏度、特异性和重复性，为鲍特菌的检测提供了有效的工具和方法。

主权项：1.用于检测百日咳鲍特菌的特异性引物探针组在制备用于特异性检测百日咳鲍特菌或诊断百日咳的试剂盒中的应用，其特征在于，所述特异性引物探针组为：（1）特异性引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3-4所示，探针序列如SEQIDNO.5所示；和（2）特异性引物的核苷酸序列如SEQIDNO.6-7所示，探针序列如SEQIDNO.8所示；所述探针含有2个淬灭基团，其中，序列如SEQIDNO.5所示的探针的2个淬灭基团分别位于3’末端和5’端第10位碱基，序列如SEQIDNO.8所示的探针的2个淬灭基团分别位于3’末端和5’端第7位碱基；所述探针中还含有1个荧光基团，所述荧光基团位于探针的5’末端；所述特异性引物中含有锁核酸修饰，其中，序列如SEQIDNO.3所示的引物的锁核酸修饰位于5’端第13位碱基，序列如SEQIDNO.4所示的引物的锁核酸修饰位于5’端第17位碱基，序列如SEQIDNO.6所示的引物的锁核酸修饰位于5’端第15位碱基，序列如SEQIDNO.7所示的引物的锁核酸修饰位于5’端第16位碱基；所述试剂盒还包含核酸扩增反应液，所述核酸扩增反应液包括如下组分：5-10倍浓缩的PCR缓冲液，dN（U）TP混合液10-30mM，UDG酶1-5UμL，MgCl2150-250mM，DNA聚合酶3-15UμL和PCR增强剂40-60%；其中，所述PCR增强剂包含如下组分：氯化锰1-3gL，SSB单链结合蛋白0.5-1.0gL，叠氮钠0.05-0.1gL，氯化铵1-2gL。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海伯杰医疗科技股份有限公司北京分公司;上海伯杰医疗科技股份有限公司 用于检测4种鲍特菌和特异性检测百日咳鲍特菌的DNA片段、引物、探针和试剂盒及应用

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