申请/专利权人：武汉大学

申请日：2022-10-18

公开（公告）日：2023-04-18

公开（公告）号：CN115976160A

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.05.05#实质审查的生效;2023.04.18#公开

摘要：本发明公开了一种基于点击化学的DNA中5‑羧基胞嘧啶5caC的富集与定位分析方法，属于化学技术领域。本发明方法首先利用1‑乙基‑3‑二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐EDC与1‑羟基苯并三唑HOBT催化5caC与炔丙胺脱水缩合，形成5‑炔丙氨酰基胞嘧啶5caC‑PA，后者进一步在铜II‑TBTA络合物的催化作用下与生物素‑聚乙二醇‑叠氮Biotin‑PEG3‑N3发生CuAAC点击化学反应，最终在5caC上修饰上生物素基团。最后，通过链霉亲和素亲和纯化，能够高效富集5caC修饰的DNA片段，并用于后续的高通量测序分析，从而获得5caC的修饰谱图。

主权项：1.一种基于点击化学的DNA中5-羧基胞嘧啶的富集与定位分析方法，其特征在于：包含以下步骤：1利用1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐与1-羟基苯并三唑催化待检DNA中的5caC与炔丙胺脱水缩合，形成5-炔丙氨酰基胞嘧啶5caC-PA；2回收5caC-PA标记的DNA；3利用铜II-TBTA络合物催化5caC-PA与生物素-聚乙二醇-叠氮发生点击化学反应；4回收生物素标记后的DNA；5利用链霉亲和素磁珠亲和富集生物素标记的含5caC修饰的DNA；6回收后的DNA进行文库构建并进行高通量测序分析，绘制5caC修饰谱图。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 武汉大学 基于点击化学的DNA中5-羧基胞嘧啶（5caC）的富集与定位分析方法

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