申请/专利权人：北京林业大学

申请日：2021-09-22

公开（公告）日：2023-08-11

公开（公告）号：CN113652390B

主分类号：C12N5/04

分类号：C12N5/04;C12N9/42;C12N9/18;C12N9/26;C12N9/88

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.08.11#授权;2021.12.03#实质审查的生效;2021.11.16#公开

摘要：本发明涉及植物原生质体技术领域，具体涉及一种紫薇原生质体的制备方法。本发明针对紫薇提供原生质体的制备方法，该方法以紫薇叶片为材料，将紫薇叶片去除下表皮，将去除下表皮的叶片在酶解液中酶解处理，得到酶解溶液，将所述酶解溶液经分离得到叶肉酶解产物，经洗涤后分离得到叶肉原生质体。该方法能够高效地从紫薇叶片中提取获得原生质体，制备的原生质体具有较高的完整性和活性，为紫薇的分子育种提供了基础。

主权项：1.一种紫薇原生质体的制备方法，其特征在于，包括：将新鲜的紫薇叶片轻微失水萎蔫后，将上表皮固定，撕去下表皮，得到去除下表皮的叶片，将去除下表皮的叶片在酶解液中酶解处理，得到酶解溶液，将所述酶解溶液经分离得到叶肉酶解产物，经洗涤后分离得到叶肉原生质体；所述酶解液由如下组分组成：纤维素酶1%、离析酶0.5%、果胶酶0.4%、甘露醇0.6M、KCl15-25mM、pH为5.5-5.8的MES15-25mM、CaCl25-15mM、BSA0.05-0.15%和DTT3-6mM；所述酶解的条件为：在25±2℃的黑暗条件下酶解5-6h。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京林业大学 一种紫薇原生质体的制备方法

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