申请/专利权人：四川阿思科力生物科技有限公司;苏州因特药物研发有限公司

申请日：2023-05-31

公开（公告）日：2023-08-22

公开（公告）号：CN116621995A

主分类号：C07K19/00

分类号：C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/04

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.09.08#实质审查的生效;2023.08.22#公开

摘要：本发明涉及细胞治疗技术领域，尤其是涉及靶向ROBO1的嵌合抗原受体、CAR细胞及应用。本发明筛选出的人源化改造的ROBO1抗体与亲本鼠源抗体对人ROBO1抗原蛋白的结合力相似，利用人源化改造的ROBO1抗体构建的CAR‑NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性明显好于OriginalscFvROBO1CAR‑NK。由此可见，将鼠源性抗人ROBO1抗体进行人源化改造，是极具意义性的。

主权项：1.靶向ROBO1的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体含有人源化抗人ROBO1抗原结合结构域；所述人源化抗人ROBO1抗原结合结构域包含可变结构域VH和可变结构域VL；所述可变结构域VH的互补决定区氨基酸序列为：VH-CDR1：GYTFTDYYMN；VH-CDR2：DIVPNNGDTTYNQNFRG；VH-CDR3：FSNYVYPFDY；所述可变结构域VL的互补决定区氨基酸序列为：VL-CDR1：RASQDISNFLN；VL-CDR2：ATSRLHS；VL-CDR3：QQGNTLPLT；所述人源化抗人ROBO1抗原结合结构域还包括选自下述氨基酸序列的至少一个框架FR，或与下述氨基酸序列的框架FR具有至少80％的序列同一性，并且，与上述互补决定区组合后与人ROBO1具有KD≤10-7molL的结合力的框架FR；所述可变结构域VH的框架FR包括：框架VH-FR1为LVQSGAEVKKPGASVKVSCKAS；框架VH-FR2为W-V-X1-Q-A-P-G-Q-X2-L-E-W-X3-G，其中，X1是R或K，X2为G或S，X3为M或I；框架VH-FR3为X4-X5-T-M-T-X6-D-X7-S-T-S-T-V-Y-M-E-L-S-S-L-R-S-E-D-T-A-V-Y-Y-C-A-R，其中，X4是R或K，X5为V或A，X6为R或V，X7为T或K；框架VH-FR4为WGQGTTVTVSS；所述可变结构域VL的框架FR包括：框架VL-FR1为I-Q-M-T-Q-S-P-S-S-L-S-A-S-V-G-D-R-V-T-I-X8-C，其中，X8为T或S；框架VL-FR2为W-Y-Q-Q-K-P-G-K-X9-X10-K-L-L-I-Y，其中，X9为A或T，X10为P或V；框架VL-FR3为G-V-P-S-R-F-S-G-S-G-S-G-T-D-F-S-L-T-I-S-K-L-E-Q-E-D-I-A-T-Y-X11-C，其中，X11为Y或F；框架VL-FR4为FGQGTKLELK。

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权利要求：

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