申请/专利权人：云南师范大学

申请日：2023-07-31

公开（公告）日：2023-08-29

公开（公告）号：CN116656650A

主分类号：C12N9/24

分类号：C12N9/24;C12N1/02;C12N1/14;C12N9/18;C12N9/26;C12N9/42;C12N9/88;C12R1/645

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的视为撤回

法律状态：2023.12.05#发明专利申请公布后的视为撤回;2023.09.15#实质审查的生效;2023.08.29#公开

摘要：本发明提供了一种基于魔芋白绢病BJ‑Y1菌株获得复合型糖苷水解酶的方法，属于生物酶催化领域，将魔芋白绢病中BJ‑Y1菌株培养至BiologFF板中并利用碳源布局图对结果进行比对与分析。利用分析结果对菌株BJ‑Y1采用单一诱导物进行水解酶的诱导发酵。发现BJ‑Y1菌株能分泌产生具有甘露聚糖酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶和木聚糖酶特性的糖苷水解酶，相同催化反应pH在4‑6范围，反应温度在50℃时水解催化效果最高。范围内包括：1）制备与纯化；2）菌株碳源代谢谱分析；3）诱导物产酶分析。本发明利用BJ‑Y1菌株发酵能够产生复合型糖苷水解酶，此复合型糖苷水解酶具有甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶的功能特性。

主权项：1.一种基于魔芋白绢病BJ-Y1菌株获得复合型糖苷水解酶的方法，其内容包括如下步骤：1）制备与纯化：采取具有典型性状为倒伏腐烂的魔芋标本，从病患处与健康交界处切取病变组织块，挑起病变组织放置于PDA培养基上于30℃培养2天，挑起新生长菌丝多次转到筛选培养基上进行分离、纯化，取生长状态好的纯化菌株放置于4℃冰箱保存备用；2）菌株碳源代谢分析：挑取PDA上的BJ-Y1菌丝在Ⅱ级生物安全柜中制备菌悬液，用移液器将菌悬液接种至FF板上，在28℃下条件下培养5天，培养完毕后进行结果获取，利用碳源布局图对结果进行比对与分析；3）诱导物产酶分析：利用步骤2）的分析结果，在含有1%蛋白胨的液体培养基中分别加入1%浓度的魔芋粉、CM纤维素钠盐、淀粉、果胶和木聚糖五种底物，灭菌冷却后接种BJ-Y1菌株，放置在30℃，转速160rmin的摇床中培养7天，取发酵液在12000rmin条件下离心5min获得离心上清液，取上清液测定酶活，得到诱导物产酶分析结果为：BJ-Y1菌株能分泌产生具有甘露聚糖酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶和木聚糖酶特性的糖苷水解酶；得到最适pH分析结果为：pH在4-5的区间范围内此酶活性最高，相对酶活均高于50%；当pH水平大于6之后则整体相对酶活表现随着pH的升高逐渐下降且均低于50%；得到最适温度分析结果为：所述此复合型糖苷水解酶最适温度范围为40℃-60℃，其中温度在50℃时酶活表现效果最佳，低于40℃，高于60℃时该复合型糖苷水解酶酶活表现效果较差。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 云南师范大学 一种基于魔芋白绢病BJ-Y1菌株获得复合型糖苷水解酶的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD