申请/专利权人：成都诺恩基因科技有限公司

申请日：2020-05-28

公开（公告）日：2023-08-29

公开（公告）号：CN113736913B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.08.29#授权;2021.12.21#实质审查的生效;2021.12.03#公开

摘要：本发明公开了一种基于病毒核酸与miRNA双向共生检测2019‑nCoV的方法及试剂盒，属于涉及RNA病毒核酸检测技术领域，其步骤包括：待检测样本病毒RNA裂解；病毒RNA捕获和miRNA捕获；扩增片段双向生成：进行RT反应得到病毒RNA衍生片段和miRNA衍生片段；将病毒RNA衍生片段和miRNA衍生片段进行同步扩增；PCR产物的荧光片段长度多态性分析；本发明的检测方法精准性高，同一反应中检出3‑6重靶标基因，涵盖了目前发布的所有新型冠状病毒的核酸序列并可与普通冠状感冒病毒进行区分；假阳性、假阴性率低；采用内源性miRNA为样本质控指标，检出率高；检测低限10‑100个分子，灵敏度高；适用范围广，病毒RNA免提取，适合自动化杂交与扩增，封闭式操作杜绝接触病毒，可有效保证操作人员安全。

主权项：1.一种非诊断目的的基于病毒核酸与miRNA双向共生检测2019-nCoV的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）待检测样本病毒RNA裂解；（2）病毒RNA捕获和miRNA捕获；（3）扩增片段双向生成：进行RT反应得到病毒RNA衍生片段和miRNA衍生片段；（4）PCR同步扩增：将病毒RNA衍生片段和miRNA衍生片段进行同步扩增；（5）PCR产物的荧光片段长度多态性分析；其中，步骤（2）中，所述病毒RNA捕获和miRNA捕获所用的核酸捕获引物组为SEQIDNO.1-13所示碱基序列的引物组合；步骤（3）中，所述RT反应还加入适配引物组，所述适配引物组为SEQIDNO.14-21所示碱基序列的引物组合；步骤（4）中，所述PCR同步扩增的PCR引物SEQIDNO.22-23所示碱基序列。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 成都诺恩基因科技有限公司 基于病毒核酸与miRNA双向共生检测2019-nCoV的方法及试剂盒

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