申请/专利权人：南京农业大学

申请日：2020-10-30

公开（公告）日：2023-09-12

公开（公告）号：CN112266904B

主分类号：C12N9/02

分类号：C12N9/02;C12N15/53;C12N15/11;C12N5/10;C12N15/84;A01H5/12;A01H6/20;C12Q1/6895

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.12#授权;2021.02.12#实质审查的生效;2021.01.26#公开

摘要：本发明为基因工程技术领域，具体涉及一个参与叶绿素合成相关的基因BnaC08‑CYP705a12及其应用。本发明从甘蓝型油菜黄化苗突变材料克隆分离得到该基因BnaC08‑CYP705a12，该基因与野生型有1个碱基的替换。本发明构建了PBI121‑BnaC08‑CYP705a12过表达载体并转化到野生型中，获得了PBI121‑BnaC08‑CYP705a12过表达转基因植株，叶片出现黄化表型；同时构建了RNAi‑BnaC08‑CYP705a12载体并转化到黄化苗中，获得了RNAi‑BnaC08‑CYP705a12转基因植株，转基因植株恢复绿叶表型。克隆得到的基因突变能够导致甘蓝型油菜叶绿素含量降低，从而引起油菜叶片黄化性状。

主权项：1.一种调控甘蓝型油菜叶绿素合成的方法，其特征在于，利用农杆菌介导的转基因方法将BnaC08-CYP705a12基因导入甘蓝型油菜受体，获得转化植株；BnaC08-CYP705a12基因的序列如SEQIDNO：2所示，其编码的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示；提取甘蓝型油菜新鲜叶片的总RNA，反转合成cDNA，以所合成的cDNA为模板，在引物P1：5’-ATGGCAGCAATGATAGTTGA-3’和P2：5’-TTAAAGGCTGAGTCGAGAAA-3’下PCR扩增；在BnaC08-CYP705a12基因的CDS序列上游加上XbaI限制性内切酶位点，上游引物P3：5’-GCTCTAGAATGGCAGCAATGATAG-3’，在BnaC08-CYP705a12基因的CDS序列下游加上SmaI限制性内切酶位点下游引物P4：5’-TCCCCCGGGTTAAAGGCTGAGTCGA-3’；得到含有BnaC08-CYP705a12植物表达载体，命名为PBI121-BnaC08-CYP705a12；转化后得到叶片黄化的BnaC08-CYP705a12过表达植株。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京农业大学 一个参与甘蓝型油菜叶绿素合成相关基因BnaC08-CYP705a12及其应用

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