申请/专利权人：江苏大学

申请日：2021-05-18

公开（公告）日：2023-09-26

公开（公告）号：CN113373101B

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/40;C12N15/75;C12N15/65;C12N15/66;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/125

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.26#授权;2021.09.28#实质审查的生效;2021.09.10#公开

摘要：本发明提供了一种表面展示RGNNVMCP蛋白的重组芽孢及其制备方法与应用，属于生物技术基因工程技术领域；在本发明中，以野生型枯草芽孢杆菌WB600菌株为载体，通过芽孢表面展示技术将RGNNV病毒的RNA2编码衣壳蛋白（MCP）展示于枯草芽孢杆菌表面，进而得到重组芽孢；所述重组芽孢可作为口服疫苗添加到稚鱼饵料中，克服现有口服疫苗容易被降解灭活、无法添加到稚鱼饵料中去的弊端，同时避免注射免疫方案中捕捞鱼和注射对鱼体的损伤，且将NNV的优良免疫原展示在芽孢表面，定植肠道进行抗原呈递，能有效的刺激鱼类的先天性及后天性免疫系统，达到防治NNV的目的。

主权项：1.一种表面展示RGNNVMCP蛋白的重组芽孢，其特征在于，所述重组芽孢分子载体为枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotC基因，导入了神经坏死病毒RGNNV蛋白基因MCP；所述表面展示RGNNVMCP蛋白的重组芽孢的制备方法，其特征在于，包括：（1）以枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白基因CotC为分子载体，与载体pET-28a构建重组质粒pET-28a-CotC，然后将MCP编码序列片段连接至重组质粒pET-28a-CotC，然后双酶切得到整合片段CotC-MCP；（2）将整合片段与pEB03质粒构建整合型重组质粒pEB03-CotC-MCP，然后将重组质粒pEB03-CotC-MCP转化至枯草芽孢杆菌，得到重组枯草芽孢杆菌；（3）将重组枯草芽孢杆菌在培养基中培养，使其产生芽孢，离心收集沉淀，得到所述表面展示RGNNVMCP蛋白的重组芽孢。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏大学 一种表面展示RGNNV MCP蛋白的重组芽孢及其制备方法与应用

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