申请/专利权人:上海太药生物医学有限公司
申请日:2021-08-23
公开(公告)日:2023-11-21
公开(公告)号:CN113564111B
主分类号:C12N5/0775
分类号:C12N5/0775
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.11.21#授权;2021.11.16#实质审查的生效;2021.10.29#公开
摘要:本申请涉及间充质干细胞培养方法的技术领域,具体公开了一种低氧培养脐带来源间充质干细胞的方法。包括以下步骤:将原代脐带来源间充质干细胞接种在培养基上,置于培养温度37℃,氧气体积分数1‑3%,二氧化碳体积分数2‑2.5%,余量氮气的环境中进行传代扩增96‑108h后,收集间充质干细胞;培养基包括基础培养基和传代添加物;基础培养基为MEM、F12、低糖DMEM和高糖DMEM中的一种或多种组合物;传代添加物以培养基终浓度计,包括以下组分,谷胱甘肽11‑15μgml,α‑生育酚0.5‑2.5μgml,β‑生育酚0.5‑2.0μgml,乙酰唑胺2.5‑3.0ngml,胰岛素10‑20μgml,维生素C8‑10μgml。本申请方法可用于对脐带来源间充质干细胞进行扩增培养,且培养所得的干细胞活性高,增殖倍数高,有利于脐带间充质干细胞生物制品的推广应用。
主权项:1.一种低氧培养脐带来源间充质干细胞的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:将原代脐带来源间充质干细胞接种在培养基上,接种密度为10000-50000个ml,置于培养温度37℃,氧气体积分数1-3%,二氧化碳体积分数2-2.5%,余量氮气的环境中进行传代扩增96-108h后,收集间充质干细胞;所述培养基是由基础培养基和传代添加物组成;所述基础培养基为F12与MEM、低糖DMEM或高糖DMEM其中一种的组合物;所述传代添加物以培养基终浓度计,各组分的用量为,谷胱甘肽11-15μgml,α-生育酚0.5-2.5μgml,β-生育酚0.5-2.0μgml,乙酰唑胺2.5-3.0ngml,胰岛素10-20μgml,维生素C8-10μgml。
全文数据:
权利要求:
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