申请/专利权人：聊城大学

申请日：2018-10-24

公开（公告）日：2023-12-05

公开（公告）号：CN110511956B

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/82

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.05#授权;2019.12.24#实质审查的生效;2019.11.29#公开

摘要：本发明提供一种根癌农杆菌介导的甜椒遗传转化方法，所述方法至少包括以下步骤：提供甜椒外植体；提供含有目的基因的根癌农杆菌，侵染甜椒外植体；选择培养；生芽培养：生根培养。采用本方法获得甜椒遗传转化率高。

主权项：1.一种根癌农杆菌介导的甜椒遗传转化方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：1提供甜椒外植体；2提供含有目的基因的根癌农杆菌，侵染甜椒外植体3～5min，共培养36～48h，共培养时采用暗培养，培养基中6-苄氨基嘌呤浓度为4～4.5mg·L-1，α-萘乙酸的浓度为0.2～0.25mg·L-1，乙酰丁香酮的浓度为50-100mmolL；3选择培养；培养基中6-苄氨基嘌呤浓度为3～4mg·L-1，α-萘乙酸的浓度为0.15～0.2mg·L-1，卡那霉素浓度为45～50mg·L-1，头孢菌素的浓度为300～400mg·L-1；4生芽培养：培养基中卡那霉素浓度为45～50mg·L-1，6-苄氨基嘌呤的浓度为3～4mg·L-1，α-萘乙酸的浓度为0.15～0.2mg·L-1，浓度为300～400mg·L-1的头孢菌素或者浓度为100～200mg·L-1的特美汀；5生根培养：培养基中α-萘乙酸的浓度为3～4mg·L-1，6-苄氨基嘌呤的浓度为0.15～0.2mg·L-1，浓度为300～400mg·L-1的头孢菌素或者浓度为100～200mg·L-1的特美汀；所述方法中使用的全部培养基的pH为5.8；所述方法中使用的培养基都为MS培养基；所述步骤2中温度23～26℃，暗培养，培养时间36～72h；所述步骤3中温度23～26℃，光照条件1800～2200lux，16-18hd，培养时间14～17d；所述步骤4中温度23～26℃，光照强度1800～2200lux，16-18hd，培养时间14～17d；所述步骤5中温度23～26℃，光照强度1800～2200lux，14-18hd，培养时间10～15d；所述步骤1还包括对甜椒外植体经过预培养，所述预培养采用的培养基是MS培养基，暗培养，培养时间36-72h，温度23-26℃；所述步骤1中甜椒外植体采用子叶节顶端的分生组织。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 聊城大学 农杆菌介导的甜椒遗传转化方法

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