申请/专利权人：赛欧双源(青岛)生物科技有限公司

申请日：2023-09-18

公开（公告）日：2023-12-08

公开（公告）号：CN117187179A

主分类号：C12N5/0783

分类号：C12N5/0783

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.12.26#实质审查的生效;2023.12.08#公开

摘要：本发明提供了利用冻存脐带血单个核细胞培养CIK细胞的方法，涉及CIK细胞培养技术领域。步骤如下：将冻存的脐带血单个核细胞置于水浴锅中进行复苏，水浴锅温度不高于38℃，按照0.5‑2×106ml密度接种于培养瓶中，细胞因子诱导的杀伤细胞CIK细胞的诱导及扩增。本发明液氮冻存的脐血单个核细胞，使用多种细胞因子联合灭活脐带血血浆诱导扩增的方法，诱导扩增采用的培养基为INF‑r、IL‑2、抗CD3抗体和10％56℃灭活脐血血浆组合，获得大量高纯度、无动物源成分的CIK细胞，用以满足临床的肿瘤治疗。

主权项：1.利用冻存脐带血单个核细胞培养CIK细胞的方法，其特征在于，步骤如下：S100、脐带血单个核细胞的复苏：将冻存的脐带血单个核细胞置于水浴锅中进行复苏，水浴锅温度不高于38℃，按照0.5-2×106ml密度接种于培养瓶中，S200、细胞因子诱导的杀伤细胞CIK细胞的诱导：先向培养瓶中添加培养基和同源脐带血血浆，添加培养基为30-50ml，培养基为GT-T551+1000Umlr-INF，同源脐带血血浆的添加量为实际培养基量的10％，按照体积计量，再将细胞培养瓶放入37℃、5％CO2恒温培养箱中进行诱导培养2-3天，培养24小时后+300UmlIL-2+50ngmlCD3，S300、细胞因子诱导的杀伤细胞CIK细胞的扩增：自恒温培养箱中取出细胞培养瓶，补液转瓶培养，记作day5，75cm2培养瓶体积不超过50ml，175cm2培养瓶体积不超过250ml，完全培养基为GT-T5511000ml+1支IL-2+10％同源脐带血血浆，培养瓶放入37℃、5％CO2培养箱中继续培养；day11进行质量检测，继续扩增；day14扩增结束，收获细胞；day5、day11和day14用于扩增天数的计算。

全文数据：

权利要求：

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