申请/专利权人:扬州大学;江苏易诺维生物医学研究院有限公司
申请日:2022-06-05
公开(公告)日:2023-12-12
公开(公告)号:CN117210505A
主分类号:C12N15/867
分类号:C12N15/867;C12N5/10;C12N15/12;A61P39/06
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2023.12.29#实质审查的生效;2023.12.12#公开
摘要:本发明公开了一种NGF基因修饰的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法,包括以下步骤:1构建含有目的基因的NGF表达载体;2将步骤1所获得的NGF表达载体与vsvg包膜质粒、ΔR8.2包装质粒共转染293细胞,包装病毒,收集细胞上清;3用步骤2收集的细胞上清感染间充质干细胞,使用嘌呤素药物筛选至少一周后,获取高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株;4用含有步骤3收集的高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株的细胞液,利用PEG6000提取外泌体,得到高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞外泌体。本发明通过构建NGF的慢病毒载体在人脐带间充质干细胞中高表达进而使MSC来源的外泌体NGF蛋白高表达,从而使其具有有效的抗氧化作用。
主权项:1.一种NGF基因修饰的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:1构建含有目的基因的NGF表达载体;2将步骤1所获得的NGF表达载体与vsvg包膜质粒、ΔR8.2包装质粒共转染293细胞,包装病毒,收集细胞上清;3用步骤2收集的细胞上清感染间充质干细胞,使用嘌呤素药物筛选至少一周后,获取高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株;4用含有步骤3收集的高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株的细胞液,利用PEG6000提取外泌体,得到高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞外泌体。
全文数据:
权利要求:
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