申请/专利权人：中国农业大学

申请日：2023-02-09

公开（公告）日：2023-12-12

公开（公告）号：CN116286574B

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/75;C12N15/62;C12N15/113;C12P7/66;C12R1/125

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.12#授权;2023.07.11#实质审查的生效;2023.06.23#公开

摘要：本发明公开了精准调控Bacillussubtilis内源多基因表达的CRISPRa方法及其应用。本发明属于基因工程领域，具体涉及精准调控Bacillussubtilis内源多基因表达的CRISPRa方法及其应用。本发明的重组枯草芽孢杆菌含有名称为dCas9‑α的蛋白质的编码基因，转录激活因子xylR的编码基因，其中dCas9‑α是由dCas9蛋白和RNA聚合酶II的α亚基连接而成的融合蛋白，RNA聚合酶II的α亚基连接在dCas9蛋白的C端。通过将A3E3表达盒导入上述重组枯草芽孢杆菌，得到的重组枯草芽孢杆菌的甲萘醌‑7产量显著提高，为研究枯草芽孢杆菌的特定生物功能提供了技术基础。

主权项：1.重组枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述重组枯草芽孢杆菌含有名称为dCas9-α的蛋白质的编码基因和转录激活因子xylR的编码基因，所述dCas9-α是由dCas9蛋白和RNA聚合酶II的α亚基连接而成的融合蛋白，所述RNA聚合酶II的α亚基连接在所述dCas9蛋白的C端；所述重组枯草芽孢杆菌还含有名称为A3E3表达盒的DNA分子，所述A3E3表达盒包括名称为sgA3box的sgRNA表达盒和名称为sgE3box的sgRNA表达盒，所述sgA3box表达名称为sgA3的靶向于枯草芽孢杆菌的ispA基因的sgRNA，所述sgE3box表达名称为sgE3的靶向于枯草芽孢杆菌的ispE基因的sgRNA，所述A3E3表达盒的核苷酸序列为序列表中序列4第196-986位。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 精准调控Bacillus subtilis内源多基因表达的CRISPRa方法及其应用

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