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【发明公布】一种浓香包包曲乳酸菌检测方法_宜宾南溪酒业有限公司_202311028636.2 

申请/专利权人:宜宾南溪酒业有限公司

申请日:2023-08-15

公开(公告)日:2023-12-29

公开(公告)号:CN117305404A

主分类号:C12Q1/06

分类号:C12Q1/06;C12Q1/04

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.05#实质审查的生效;2023.12.29#公开

摘要:本发明公开了一种浓香包包曲乳酸菌检测方法,步骤一:添加抗生素与混酸;稀释涂布平板法:将培养基灭菌后冷却至60‑70℃时,在MRS培养基中按照每100mL培养基添加0.05mL两性霉素母液的比例加入两性霉素母液,同时添加体积分数0.1%乙酸:乳酸=1:3的酸抑制芽孢杆菌生长;步骤二:倒平板;待培养基冷却至50℃时倒入平板中,每个平板中含培养基15‑20mL;待平板凝固后,于无菌操作室中倒置放置2‑3天;本发明的浓香包包曲乳酸菌检测方法,通过添加适量抗生素与混酸,抑制浓香包包曲样品菌液中芽孢杆菌类微生物的生长,在不影响乳酸菌类微生物生长的情况下,除去芽孢杆菌类微生物对乳酸菌总数检测的干扰,达到快速准确检测浓香包包曲中乳酸菌含量的效果。

主权项:1.一种浓香包包曲乳酸菌检测方法,其特征在于:具体步骤包括:步骤一:添加抗生素与混酸;稀释涂布平板法:将培养基灭菌后冷却至60-70℃时,在MRS培养基中按照每100mL培养基添加0.05mL两性霉素母液的比例加入两性霉素母液,同时添加体积分数0.1%乙酸:乳酸=1:3的酸抑制芽孢杆菌生长;步骤二:倒平板;待培养基冷却至50℃时倒入平板中,每个平板中含培养基15-20mL;待平板凝固后,于无菌操作室中倒置放置2-3天,待平板干燥,无冷凝水、无污染后即可使用;步骤三:编号;S31:取盛有10mL已灭菌生理盐水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4;S32:取干燥后的平板,用记号笔标明培养基名称与所需涂布梯度,每个梯度设置2个平行,在每个平板中倒入无菌玻璃珠4-6颗,将平板倒置备用;同时设置两个空白对照平板;步骤四:菌悬液的制备;S41:称取10g曲样至90ml生理盐水中,于30℃,180rmin摇床活化30min后取出,制成10-1菌悬液;S42:以无菌枪头吸取1mL10-1菌悬液至盛有9mL的生理盐水的试管中,在涡旋混匀器上混匀,制成10-2菌悬液;按照上述步骤,制备10倍递增系列稀释样品匀液;每递增稀释一次,换用1支1mL的无菌枪头;步骤五:涂布;根据对大曲样品中乳酸菌数的估计,选择2-3个适宜的稀释梯度,各取100uL菌悬液涂布于培养基上,每个稀释度做三个平行,于37℃,培养1-2天,计数;同时准备空白对照平板一起培养;步骤六:菌落计数;观察记录稀释倍数和相应的乳酸菌菌落数,以菌落形成单位CFU表示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 宜宾南溪酒业有限公司 一种浓香包包曲乳酸菌检测方法

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