申请/专利权人：兰州大学

申请日：2023-09-21

公开（公告）日：2024-01-05

公开（公告）号：CN117343189A

主分类号：C07K16/40

分类号：C07K16/40;C12N7/01;A61K39/395;A61P35/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要：本发明适用于生物医药技术领域，提供了表达ENO1人鼠嵌合抗体的重组腺相关病毒的制备方法，包括以下步骤：rAAV‑ENO1‑ximab质粒的构建及鉴定；rAAV‑ENO1‑ximab重组腺相关病毒的制备。本发明还提供了一种表达ENO1人鼠嵌合抗体的重组腺相关病毒的制备方法制备得到的rAAV‑ENO1‑ximab重组腺相关病毒。本发明还提供了一种rAAV‑ENO1‑ximab重组腺相关病毒在制备抑制宫颈癌细胞增殖、迁移或糖酵解药物中的应用。本发明制备得到的rAAV‑ENO1‑ximAb重组腺相关病毒对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及糖酵解有明显抑制作用。

主权项：1.表达ENO1人鼠嵌合抗体的重组腺相关病毒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：rAAV-ENO1-ximab质粒的构建及鉴定：按照PCR反应体系进行目的基因ENO1-ximab扩增，对扩增产物进行纯化及胶回收，用内切酶XbaI、HindⅢ对pAAV2-MCS载体质粒和目的基因的PCR纯化产物进行大量酶切，酶切后再次产物纯化，用T4连接酶将目的基因连接在载体质粒pAAV2-MCS上，并将连接产物转到DH5α感受态细胞中，挑取阳性克隆进行扩增、提取质粒，得到rAAV-ENO1-ximab质粒，所述目的基因ENO1-ximab的序列如SEQIDNO.1所示；S2：rAAV-ENO1-ximab重组腺相关病毒的制备：采用AAV载体系统，在辅助质粒pHelper、pAAV-RC的基础上，将重组质粒rAAV-ENO1-ximab转染到AAV293细胞中，制备得到rAAV-ENO1-ximab重组腺相关病毒。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 兰州大学 表达ENO1人鼠嵌合抗体的重组腺相关病毒及制备方法

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