申请/专利权人:佛山市第一人民医院
申请日:2023-11-27
公开(公告)日:2024-01-09
公开(公告)号:CN117363732A
主分类号:C12Q1/6886
分类号:C12Q1/6886;C12Q1/686;C12Q1/6844;C12N15/11
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.01.26#实质审查的生效;2024.01.09#公开
摘要:本申请提出了一种提高ctDNA检测灵敏度的方法,涉及突变基因检测技术领域。其包括以下步骤:通过TA克隆的方式将生物素标记的环形接头添加到ctDNA序列两端;用链霉亲和素磁珠吸附生物素标记的ctDNA序列;设计引物和探针,引物1和引物2按照突变碱基左边序列进行设计,引物3和引物4按突变碱基右边序列进行设计,探针设计在环形接头序列上;利用引物1、引物2、引物3和引物4分别对ctDNA进行荧光PCR扩增,通过检测荧光信号,判断是否存在突变位点。此方法通过构建环形接头将双链的ctDNA变成互补的单链环形序列,使得突变碱基序列位于ctDNA序列两端附近的序列也能检测到,提升了ctDNA检测的灵敏度。
主权项:1.一种提高ctDNA检测灵敏度的方法,其特征在于,其包括以下步骤:S1、通过TA克隆的方式将生物素标记的环形接头添加到ctDNA序列两端;S2、用链霉亲和素磁珠吸附生物素标记的ctDNA序列;S3、设计引物和探针,引物1和引物2按照突变碱基左边序列进行设计,引物3和引物4按突变碱基右边序列进行设计,探针设计在环形接头序列上;S4、利用引物1、引物2、引物3和引物4分别对ctDNA进行荧光PCR扩增,通过检测荧光信号,判断是否存在突变位点。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 佛山市第一人民医院 一种提高ctDNA检测灵敏度的方法
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