申请/专利权人：荆楚理工学院

申请日：2022-04-20

公开（公告）日：2024-01-19

公开（公告）号：CN114774406B

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C40B40/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.19#授权;2022.08.09#实质审查的生效;2022.07.22#公开

摘要：本发明公开了一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法。具体地公开了一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法，所述方法包括将蔷薇属植物组织经液氮研磨后，进行连续三次裂解和提取的步骤，所述三次裂解和提取分别采用溶液A、溶液B和溶液C进行裂解，并公开了溶液A、溶液B和溶液C的组分。本发明方法有效解决了次生代谢物质、蛋白质、和DNA等对RNA提取的干扰问题，显著提高了蔷薇属植物组织总RNA的提取质量和效率。本发明方法具有高效率、高质量、低成本、周期短、稳定好、操作简单和易于广泛应用等优点，提取的总RNA完整性好、纯度高、得率高，可直接用于RT‑PCR、cDNA文库构建等下游分子生物学实验。

主权项：1.一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法，其特征在于，所述方法包括将蔷薇属植物组织经液氮研磨得到粉末，将所述粉末进行三次裂解和提取后再进行氯仿抽提和异丙醇沉淀，得到蔷薇属植物组织总RNA，所述三次裂解和提取分别采用溶液A、溶液B和溶液C进行裂解提取，其中：所述溶液A的组成为：0.1M三羟甲基氨基甲烷、0.05M乙二胺四乙酸、0.5M氯化钾、1.5M氯化钠、20gL十六烷基三甲基溴化铵、体积分数为4％的β-巯基乙醇和体积分数为4％的湿润剂P-40，其余为水；所述溶液B的组成为：0.1M三羟甲基氨基甲烷、2M氯化锂、20gL十二烷基肌氨酸钠、100gL聚乙二醇8000和40gL聚乙烯吡咯烷酮，其余为水；所述溶液C的组成为：4M异硫氰酸胍、0.2M醋酸钠、体积分数为50％的水饱和酚、1gL8-羟基喹啉和体积分数为2％的β-巯基乙醇，其余为水；所述三次裂解和提取包括如下步骤：1将所述粉末与所述溶液A涡旋混匀，静置3-5min，离心，吸取上清液；2将步骤1得到的上清液与所述溶液B振荡混匀，静置3-5min，离心，吸取上清液；3将步骤2得到的上清液与所述溶液C，振荡混匀，静置3-5min，完成所述三次裂解和提取。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 荆楚理工学院 一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法

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