申请/专利权人：安徽工业大学

申请日：2021-03-30

公开（公告）日：2024-01-19

公开（公告）号：CN113073132B

主分类号：C12Q1/6844

分类号：C12Q1/6844;C12Q1/6883;G01N21/76

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.19#授权;2021.07.23#实质审查的生效;2021.07.06#公开

摘要：本发明设计合成基于DNAzyme的能够精准捕获目标miRNA并能实现循环放大的探针，再将AgNCs的ECL信号与目标循环和杂化链式扩增的信号放大策略相结合，构建了用于心肌梗死中miRNA检测的超灵敏ECL生物传感器，同时ECL生物传感器可用于检测心肌梗死相关的miRNA。本发明通过以DNA‑AgNCs为ECL发射体，以DNA‑AgNCs为发光体的ECL具有低毒性，避免了标记过程，有利于其进一步的传感应用。此外，将循环扩增技术与杂化链式扩增反应相结合，成功地构建了一种灵敏的通用型ECL生物传感器，可用于同时检测心肌梗死相关的miRNA，其线性范围从1nM到0.1fM，可以应用于实际样品的检测。

主权项：1.一种ECL生物传感器，采用下述方法制备得到：（1）、预处理电极；（2）、将发夹DNA修饰于电极表面；（3）、加MCH防止非特异性结合；（4）、加入miRNA、辅链DA、辅链DB形成信号循环放大单元进而产生酶切产物；（5）、加入发夹DNA1（S2-HP1）、DNA2（S2-HP2）进行杂化链式扩增反应；（6）、将AgNO3溶液滴到修饰好电极的表面，再用NaBH4进行还原；步骤（2）修饰于电极表面是指将发夹DNA即S1-HP于电极上孵育；所述S1-HP序列为序列表中SEQNO.1；步骤（4）加辅链DA、辅链DB、miRNA一起退火滴在电极表面孵育，再加Mg2+孵育过夜；所述辅链DA、辅链DB序列分别为序列表中SEQNO.2和SEQNO.3；步骤（5）发夹DNA1即S2-HP1、发夹DNA2即S2-HP2一起退火再加Mg2+滴在电极表面孵育；所述S2-HP1、S2-HP2序列分别为序列表中SEQNO.4和SEQNO.5。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 安徽工业大学 ECL生物传感器及其在制备用于检测心梗miRNA的检测体系中的应用

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