申请/专利权人：华南农业大学

申请日：2022-03-30

公开（公告）日：2024-02-02

公开（公告）号：CN115197888B

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/74;C12Q1/02;C12R1/42

优先权：["20210928 CN 2021111580903"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.02#授权;2022.11.04#实质审查的生效;2022.10.18#公开

摘要：本发明公开了一株鼠伤寒沙门氏菌htpG及其构建方法和应用，所述鼠伤寒沙门氏菌htpG保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO：M2021957，保藏日期为2021年7月30日。其基于Red同源重组技术对鼠伤寒沙门氏菌进行改造，且为鼠伤寒沙门氏菌的防治提供理论基础。

主权项：1.一种鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）htpG的构建方法，其特征在于，所述鼠伤寒沙门氏菌htpG保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO：2021957，保藏日期为2021年7月30日，所述构建方法包括如下步骤：外源靶基因片段扩增，其扩增引物对组包括htpG基因两侧的延伸同源序列以及pKD4质粒互补序列；制备鼠伤寒沙门氏菌野生菌感受态细胞，并在其中转入pKD46质粒，制备得到含有pKD46质粒的鼠伤寒沙门氏菌；鼠伤寒沙门氏菌htpG基因敲除，以得到鼠伤寒沙门氏菌htpG缺失菌株；鼠伤寒沙门氏菌htpG基因敲除包括如下步骤：制备含有pKD46质粒的鼠伤寒沙门氏菌感受态细胞；将外源靶基因片段转至含有pKD46质粒的鼠伤寒沙门氏菌感受态细胞中，获得重组鼠伤寒沙门氏菌；将pCP20质粒转导入重组鼠伤寒沙门氏菌中，诱导其表达可识别FRT位点的FLP重组酶，以将两个FRT位点间的靶基因片段消除，以得到鼠伤寒沙门氏菌htpG。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华南农业大学 一株鼠伤寒沙门氏菌htpG及其构建方法和应用

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