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【发明授权】无内毒素质粒快速提取试剂盒及质粒提取方法_山东思科捷生物技术有限公司_202210425000.0 

申请/专利权人:山东思科捷生物技术有限公司

申请日:2022-04-22

公开(公告)日:2024-02-09

公开(公告)号:CN114621950B

主分类号:C12N15/10

分类号:C12N15/10

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.02.09#授权;2022.07.01#实质审查的生效;2022.06.14#公开

摘要:本发明提出一种无内毒素质粒快速提取试剂盒及质粒提取方法,属于分子生物学领域,能够解决现有的内毒素去除方法存在操作复杂、成本高、去除效果差且有RNA残留的技术问题。其中,本发明无内毒素质粒快速提取试剂盒包括裂解试剂组、杂质去除试剂、内毒素清除试剂、洗脱试剂组和至少一个吸附柱;质粒提取方法包括:样品重悬与裂解、内毒素清除、杂质去除、杂质漂洗和质粒DNA洗脱步骤。利用本发明的无内毒素质粒快速提取试剂盒提取的质粒内毒素含量低于0.1EUμg,能够满足细胞转染、基因治疗、基因工程等需较低水平内毒素的实验和研究要求。

主权项:1.无内毒素质粒快速提取试剂盒,其特征在于,由裂解试剂组、杂质去除试剂、内毒素清除试剂、洗脱试剂组和至少一个吸附柱组成;其中,所述内毒素清除试剂含有pH=6.5-7.5、浓度为10-200mmoL的Tris-HCl缓冲液、浓度为10-200mmoL氯化钠、体积分数为10%-20%的TritonX-114、质量体积比为0.0001%-0.005%的溴酚蓝;所述杂质去除试剂为去蛋白液,其含有pH=7.0-7.5,浓度为4-6M盐酸胍、浓度为10-200mM的Tris-HCl缓冲液和体积分数为40%-60%的异丙醇;利用所述无内毒素质粒快速提取试剂盒提取的质粒无RNA残留且内毒素含量低于0.1EUμg。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东思科捷生物技术有限公司 无内毒素质粒快速提取试剂盒及质粒提取方法

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