申请/专利权人：徐州医科大学

申请日：2023-10-16

公开（公告）日：2024-02-20

公开（公告）号：CN117568369A

主分类号：C12N15/62

分类号：C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.08#实质审查的生效;2024.02.20#公开

摘要：本发明公开了一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统及方法和应用，该系统包括诱导表达自杀基因‑诱饵载体和RNA酶‑待选RNA结合蛋白融合表达载体。诱导表达自杀基因‑诱饵载体是一个可诱导表达的杂合RNA，含有自杀基因表达框及诱饵RNA；RNA酶‑待选RNA结合蛋白融合表达载体是通过基因工程方法使RNA酶与待选RNA结合蛋白形成一个融合蛋白；当融合蛋白的RNA结合蛋白特异识别诱饵RNA时，融合蛋白的RNA酶活性会破坏诱导表达的杂合RNA，使诱导表达的自杀基因减少，从而使细胞活下来，否则细胞死亡。本发明实现了特异、高效和简易地筛选与RNA结合的蛋白，可用于开发任意一种靶向RNA的药物，简单实用。

主权项：1.一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统，其特征在于，包括诱导表达自杀基因-诱饵载体和RNA酶-待选RNA结合蛋白融合表达载体；所述诱导表达自杀基因-诱饵载体为可诱导表达的杂合RNA，含有自杀基因表达框及诱饵RNA；所述自杀基因为任意一个由基因编码的，可引起细胞毒性导致细胞死亡的基因；所述RNA酶-待选RNA结合蛋白融合表达载体为SA-NCD-待选RNA结合蛋白融合表达载体，其中RNA酶为人源MCPIP1的RNA酶活性结构域NCD，通过基因工程手段将链霉亲和素SA与NCD构建到一起形成SA-NCD的重组蛋白，再将SA-NCD后面连接上待选RNA结合蛋白编码序列，构建所述SA-NCD-待选RNA结合蛋白融合表达载体；当所述RNA酶-待选RNA结合蛋白融合表达载体中的待选RNA结合蛋白特异识别诱饵RNA时，融合表达载体中的RNA酶活性会破坏诱导表达的杂合RNA，使诱导表达的自杀基因减少，从而使细胞活下来，否则细胞死亡，通过检测活细胞融合表达载体的信息可知与诱饵RNA结合的基因信息，从而获得RBP基因序列，实现快速筛选。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 徐州医科大学 一种快速筛选与诱饵RNA结合的蛋白系统及方法和应用

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