申请/专利权人：湖南科技大学

申请日：2021-06-16

公开（公告）日：2024-02-20

公开（公告）号：CN113234837B

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.20#授权;2021.08.27#实质审查的生效;2021.08.10#公开

摘要：本发明公开了一种通过环境DNA提取及定量PCR来检测样本中是否存在过棉铃虫的试剂盒及其应用方法，包括：聚碳酸酯蚀滤膜、碱性溶解液、定量PCR反应液、棉铃虫特异性引物对和Taqman荧光探针。使用时，先清洗待测果蔬样品，以滤膜富集洗液中的环境DNA并用碱性溶解液回收；环境DNA经过柱纯化后，作为模板加入定量PCR反应液中，并加入引物对和探针，与不加模板的对照组平行做定量PCR反应；通过比较待测样本与对照组在反应中Cq值的差异，判断样本中棉铃虫DNA的有无及相对含量。本发明可在尚未观察到棉铃虫虫体时即检测出果蔬中是否存在过该害虫，提升了检测能力和效率。

主权项：1.一种根据目标害虫棉铃虫基因设计的引物对和Taqman荧光探针在制备基于陆生环境DNA检测棉铃虫的试剂盒中的应用，其特征在于，所述棉铃虫的DNA序列如SEQIDNO.1所示；所述引物对的DNA序列如SEQIDNO.2-3所示；所述Taqman荧光探针的DNA序列如SEQIDNO.4所示；所述SEQIDNO.1具体为5-CCATTCCAACAGCGCTCATTCTCCTCAGCAGCGAAGTCAGGTTTGTCACACACTCGATCCGCTAGTCCAGCAAAGAGTTTCTTATTCGACGCTAGGGTGGCTGCAAATAG-3所述SEQIDNO.2具体为：CCATTCCAACAGCGCTCATT；所述SEQIDNO.3具体为：CTATTTGCAGCCACCCTAGC；所述SEQIDNO.4具体为：AGCGAAGTCAGGTTTGTCACACACTCGAT。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 湖南科技大学 基于陆生环境DNA检测棉铃虫的试剂盒及其应用

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