申请/专利权人：北京三诺佳邑生物技术有限责任公司

申请日：2023-08-17

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN117604038A

主分类号：C12N15/867

分类号：C12N15/867;C12N15/65;C12N15/113;C12N5/10;C12Q1/6897;C12Q1/02

优先权：["20220822 CN 2022110098706"]

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开

摘要：本发明提供了一种灵敏检测siRNA或shRNA生物学活性的方法，所述方法包括构建一种携带报告基因的重组表达载体，所述重组表达载体包含Tet‑on表达调控系统、报告基因以及一个或多个siRNA或shRNA靶序列，构建相应的稳转细胞系，然后通过Tet‑on表达调控系统及报告基因的表达，检测siRNA或shRNA的活性。本发明还提供方法中所述重组表达载体，以及相应稳转细胞系。本发明提供的方法操作简单、适用性广，并且可使siRNA或shRNA活性检测灵敏度得到明显提升，特别是对于表达量低或活性低的siRNA或shRNA基因药物的沉默活性提供了有效的检测手段。

主权项：1.一种检测siRNA或shRNA的生物学活性的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1构建携带报告基因的重组表达载体，所述重组表达载体包含Tet-on表达调控系统、报告基因以及一个或多个siRNA或shRNA靶序列；2将上述重组表达载体导入细胞系，以获得包含上述重组表达载体的稳转细胞系；3向上述稳转细胞系加入待测的siRNA或shRNA，以及加入四环素或四环素类似物以诱导报告基因的表达；4通过检测报告基因的表达量，确定siRNA或shRNA的生物学活性。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 一种检测siRNA或shRNA的生物学活性的方法

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