申请/专利权人:北京全式金生物技术股份有限公司
申请日:2023-11-27
公开(公告)日:2024-02-27
公开(公告)号:CN117603960A
主分类号:C12N15/10
分类号:C12N15/10;C12Q1/6806
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开
摘要:本发明公开一种无内毒素质粒DNA提取试剂、试剂盒及其应用。本发明首先公开了无内毒素质粒DNA提取试剂,包括重悬液,裂解液,中和液,内毒素清除液,漂洗液和洗脱液。本发明进一步还公开了上述提取试剂在质粒DNA提取上的应用。本发明基于现有的碱裂解法技术上进行改进提供了一种质粒DNA提取试剂,利用该试剂实现了一种提取产量高,内毒素水平低于0.1EUμg,无RNA残留,超螺旋比例高于90%,操作时长低于1小时,操作难度低,无需冰浴水浴的质粒DNA提取方法,该方法大大提高了质粒DNA提取效率,且适用性广,可以对多种培养基多种工程菌来源的不同质粒进行处理,并获得无内毒素级别的质粒DNA。
主权项:1.一种无内毒素质粒DNA提取试剂,其特征在于,所述提取试剂包括重悬液,裂解液,中和液,内毒素清除液,漂洗液和洗脱液;其中,所述裂解液包含0.2molL的NaOH,质量浓度1%的SDS和质量浓度0.5%-5%的PEG4000;所述内毒素清除液包含体积浓度10%-20%的TritonX-114,质量浓度1%-5%的SDS,质量浓度1-5%的多粘菌素B和体积浓度10%-20%的邻苯甲酸二丁酯。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 北京全式金生物技术股份有限公司 一种无内毒素质粒DNA提取试剂、试剂盒及其应用
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