申请/专利权人：合肥工业大学

申请日：2021-08-16

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN113564092B

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/62;C12N15/70;C12P19/08;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.27#授权;2021.11.16#实质审查的生效;2021.10.29#公开

摘要：本发明公开了一种可以定向合成低分子量右旋糖酐的融合酶大肠杆菌工程菌的构建方法以及其应用，以P473SP856S双突变的热稳定型右旋糖酐蔗糖酶基因和链球菌来源的右旋糖酐酶基因为模板，以EAAAKnn＝0,1,2为连接肽将两个酶基因按催化顺序进行同源重组并转化到BL21DE3大肠杆菌中，获得的可以定向合成不同低分子量右旋糖酐的融合酶大肠杆菌BL21DE3dex‑YG‑nG‑a1dexn＝0,1,2基因工程菌。本发明构建的dex‑YG‑nG‑a1dexn＝0,1,2基因工程菌合成的右旋糖酐分子量集中，本发明构建的dex‑YG‑nG‑a1dexn＝0,1,2基因工程菌能通过控制条件与连接肽将大部分蔗糖直接转化为不同低分子量的右旋糖酐，其中可以直接获得右旋糖酐的重均分子量为1000‑2000Da，5000Da，10000Da。

主权项：1.一种可定向合成右旋糖酐的融合酶大肠杆菌工程菌在制备低分子量右旋糖酐中的应用，其特征在于，先将大肠杆菌工程菌BL21（DE3）dex-YG-nG-a1dex（n=1,2）进行发酵表达出融合酶，然后以蔗糖为底物经融合酶双功能催化可直接获得不同低分子量的右旋糖酐；所述可定向合成右旋糖酐的融合酶大肠杆菌工程菌的构建方法，其是以GenbankNo.DQ345760的右旋糖酐蔗糖酶基因进行P473SP856S双突变的基因和GenbankNo.HQ711852.1的链球菌来源的右旋糖酐酶基因为模版，以EAAAKn（n=1,2）为连接肽将两个酶基因按顺序进行同源重组并转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，得到可以定向合成不同低分子量右旋糖酐的融合酶大肠杆菌工程菌BL21（DE3）dex-YG-nG-a1dex（n=1,2）。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 合肥工业大学 一种定向合成右旋糖酐的融合酶及其构建方法与应用

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