申请/专利权人：尧唐(南京)生物科技有限公司

申请日：2023-12-06

公开（公告）日：2024-03-08

公开（公告）号：CN117660439A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开

摘要：本发明提供了一种纯化poly‑A末端修饰mRNA的方法及其应用，所述方法包括：1将LiCl溶液加入含有未连接poly‑A的mRNA片段和poly‑A末端修饰mRNA的反应体系中，所述LiCl在反应体系中的终浓度为1‑1.25M，所述反应体系中mRNA总浓度为200‑400ngμL，混合后孵育，离心去上清，收集沉淀；2采用磁珠纯化法去除沉淀中未连接poly‑A的mRNA片段，得到poly‑A末端修饰mRNA。本发明的纯化方法耗时短，工艺流程简单大大节约成本；纯化过程温度低，保障了mRNA的稳定性；纯化效果好，杂质少，mRNA表达水平高，在mRNA药物制备和纯化中具有重要的应用价值。

主权项：1.一种纯化poly-A末端修饰mRNA的方法，其特征在于，所述方法包括：1将LiCl溶液加入含有未连接poly-A的mRNA片段和poly-A末端修饰mRNA的反应体系中，所述LiCl在反应体系中的终浓度为1-1.25M，所述反应体系中mRNA总浓度为200-400ngμL，混合后孵育，离心去上清，收集沉淀；2采用OligodT磁珠吸附沉淀中连接poly-A的mRNA片段，依次采用溶液A、溶液B和溶液C重悬磁珠，得到poly-A末端修饰mRNA；所述溶液A的组分包括：磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠和EDTA；所述溶液B的组分包括：磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和EDTA；所述溶液C为Tris缓冲溶液。

全文数据：

权利要求：

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