申请/专利权人：南京派森诺基因科技有限公司

申请日：2023-12-11

公开（公告）日：2024-03-08

公开（公告）号：CN117660443A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开

摘要：本发明公开了一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法，涉及分子生物学技术领域，所述浆果果实基因组DNA高质量提取方法包括以下步骤：将新鲜或冷冻浆果果实样品置于研钵内，加入提前准备的PVP10并进行研磨，研磨结束后收集至离心管中备用；向离心管中加入分离液，先震荡混匀1min，再冰上放置10min，最后放入4℃冷冻离心机中，8000rpm离心5min；吸去离心管中的上清液体，并向底部沉淀中加入56℃预热的裂解液16ml，再振荡混匀1min，56℃水浴锅孵育30min；利用分离液有效去除浆果中多糖、多酚等杂质对于基因组DNA干扰，提高DNA的纯度，改良版的裂解液能够充分裂解浆果植物细胞，用氯仿、无水乙醇和醋酸钾过滤掉多余蛋白成分，得到的基因组DNA纯度高，DNA完整性更好。

主权项：1.一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法，其特征在于，所述浆果果实基因组DNA高质量提取方法包括以下步骤：S1：将15g新鲜或冷冻浆果果实样品置于研钵内，加入提前准备的20mgPVP10并进行研磨，研磨时间2—3min，研磨结束后收集至50ml离心管中备用；S2：向离心管中加入20ml分离液，先震荡混匀1min，再冰上放置10min，最后放入4℃冷冻离心机中，8000rpm离心5min；S3：吸去离心管中的上清液体，并向底部沉淀中加入56℃预热的裂解液16ml，再振荡混匀1min，56℃水浴锅孵育30min，孵育期间手摇震荡几次；S4：向离心管加入除杂液A，并置于多管涡旋混匀仪震荡15min，再1200rpm离心10min；S5：转移上清液到新的50ml离心管中，向上清液中加入5ulRnase酶震荡混匀，静置5min，加入等体积的除杂液B抽提，震荡混匀后，1200rpm离心10min，抽提后的上清液转入新的50ml离心管中，重复此步骤一次；S6：向转入新50ml离心管中的上清液内加入0.8倍体积提前预冷的异丙醇，放置于-20℃15min，让DNA沉淀析出；S7：移去上清液，用漂洗液漂洗两次，离心后干燥5min；S8：加入60ul洗脱液溶解，56℃水浴10min；S9：溶解的DNA-20℃保存。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京派森诺基因科技有限公司 一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD