申请/专利权人：华南农业大学

申请日：2023-12-18

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117701612A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种简便高效的细菌基因回补表达方法。本发明利用自杀型质粒无法在宿主菌复制的特性，构建携带目的基因及其上下游同源臂的重组质粒，并利用同源重组将重组质粒整合到缺失靶基因的宿主菌基因组上，从而实现靶基因在宿主菌中的回补。通过本发明方法所获得的回补菌株克服了质粒游离表达的不稳定性，实现了靶基因的1:1回补，同时避免了基因原位敲入的繁琐步骤，另辟蹊径地发展了一种简便高效的细菌基因回补表达方法，为细菌的基因功能研究提供了新的技术手段。

主权项：1.一种简便高效的细菌基因回补表达方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、针对目标宿主菌，选择无法在宿主菌内自主复制的自杀型质粒；S2、扩增靶基因及其上、下游同源臂片段，然后将这些片段连接到步骤S1的自杀型质粒上，得到基因回补重组质粒；S3、将步骤S2的重组质粒导入缺失靶基因的宿主菌中，经筛选后获得靶基因回补的菌株。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华南农业大学 一种简便高效的细菌基因回补表达方法

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