申请/专利权人：北京源生康泰基因科技有限公司

申请日：2023-12-12

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117701678A

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明涉及微生物基因检测技术领域，具体涉及一种用于高效去除感染样本宿主核酸的方法，特别适用于肺泡灌洗液、痰液、脑脊液等感染样本的病原体宏基因组检测和宏转录组检测。通过RIPA裂解液将宿主和微生物差异裂解，并使用全能核酸酶去除宿主核酸，大大降低宿主基因组占比，包括步骤：对采集样本进行富集；裂解宿主细胞；消化宿主核酸；富集微生物细胞；裂解微生物，回收微生物核酸。本发明可同时消化宿主DNA和RNA，使其同时适用于宏基因组测序和宏转录组测序。该方法可在60min内完成宿主核酸的去除及回收微生物核酸全过程，可去除感染样本中2％‑95％的宿主核酸，大幅提高感染样本中病原微生物核酸比例，具有高效、简易、低成本和快速去宿主核酸的特点。

主权项：1.一种用于高效去除感染样本宿主核酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，对采集样本进行富集：采用高速离心对样本进行离心，离心所得沉淀作为富集后的样本；S2，对所述富集后的样本进行宿主细胞裂解：取富集后的样本加入蛋白裂解液得到第一反应液；S3，宿主核酸消化：配置缓冲液，混合第一反应液和缓冲液孵育，得到第二反应液；S4，对样本微生物富集：采用高速离心富集微生物菌体；S5，对富集微生物裂解，回收微生物核酸：通过高速研磨破碎，释放微生物核酸，再使用商业化磁珠法核酸回收试剂进行微生物核酸回收。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京源生康泰基因科技有限公司 一种用于高效去除感染样本宿主核酸的方法

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