申请/专利权人：善恩康生物科技(苏州)有限公司

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117487664B

主分类号：C12N1/02

分类号：C12N1/02;C12N1/20;C12R1/01

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2024.02.23#实质审查的生效;2024.02.02#公开

摘要：本发明公开了双歧杆菌分离培养方法，涉及生物医药技术领域。所述的方法包括以下步骤：（1）将成人粪便样本加入富集培养基，厌氧培养，得到富集培养液；（2）将富集培养液进行梯度稀释，得稀释液；（3）将稀释液涂布于筛选培养基中，厌氧培养，得初筛菌；（4）挑取双歧杆菌单菌落，接种于液体增菌培养基中，厌氧培养，得双歧杆菌；步骤（3）中所述的筛选培养基按照重量份数计包括蛋白胨20‑30份、可溶性淀粉0.1‑10份、氯化钠1‑10份、琼脂5‑15份、5‑15无菌脱纤维羊血和0.01‑1份盐酸头孢吡肟；步骤（3）中所述厌氧培养的时间为48‑72h。本发明的方法分离双歧杆菌的效果较好。

主权项：1.一种从成人粪便中分离培养双歧杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将成人粪便样本加入富集培养基，厌氧培养，得到富集培养液；（2）将富集培养液进行梯度稀释，得稀释液；（3）将稀释液涂布于筛选培养基中，厌氧培养，得初筛菌；（4）挑取双歧杆菌单菌落，接种于液体增菌培养基中，厌氧培养，得双歧杆菌；步骤（3）中所述的筛选培养基由以下成分制成：特殊蛋白胨20-30重量份、可溶性淀粉0.1-10重量份、氯化钠1-10重量份、琼脂5-15重量份、2×10-5重量份或5×10-5重量份盐酸头孢吡肟和5%无菌脱纤维羊血；步骤（3）中所述厌氧培养的时间为48-72h；步骤（1）中所述的富集培养基按照重量份数计由以下成分制成：蛋白胨5-15份、葡萄糖10-30份、酵母浸粉1-10份、牛肉膏5-15份、K2HPO41-5份、柠檬酸二铵1-5份、乙酸钠1-10份、MgSO4·7H2O0.1-1份、MnSO4·4H2O0.1-1份、吐温801-10份和0.1-5份L-半胱氨酸；步骤（4）中所述的液体增菌培养基由以下成分制成：脑心浸液肉汤粉末30-40份、0.01-1%的氯化血红素和0.01-1%的维生素K1。

全文数据：

权利要求：

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