申请/专利权人:广西壮族自治区药用植物园
申请日:2023-12-20
公开(公告)日:2024-03-19
公开(公告)号:CN117721181A
主分类号:C12Q1/6806
分类号:C12Q1/6806;C12Q1/6844;C12N15/10
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.05#实质审查的生效;2024.03.19#公开
摘要:本发明公开了一种以磁珠作为待检物载体的核酸扩增检测方法及其应用,其包括步骤如下:将含有磁性内芯的套筒状磁分离结构放入含有核酸‑磁珠复合物的液体的试管内,摇动,套筒状磁分离结构外侧通过磁力吸附核酸‑磁珠复合物,形成核酸‑磁珠复合物在套筒状结构外周聚集的核酸‑磁珠聚集结构;将核酸‑磁珠聚集结构从试管中取出,放入含有清洗液的试管中,摇振混悬,核酸‑磁珠聚集结构在清洗液内进行聚集状态的原位清洗;清洗后的核酸‑磁珠复合物不经过核酸洗脱就放入核酸扩增反应液内,形成的核酸扩增反应物采用目测检测进行结果判读。本发明不仅可以避免核酸洗脱转移所带来的污染风险,更重要的是提高了核酸扩增反应液内的模板浓度,增加了检测灵敏度。
主权项:1.以磁珠作为待检物载体的核酸扩增检测方法,其特征在于,包括步骤如下:1在含有待检核酸的试管中加入核酸提取专用磁珠,摇振混悬,待检核酸与磁珠结合并捕获,形成核酸-磁珠复合物;采用套筒状磁分离结构吸附提取待检核酸,所述套筒状磁分离结构为可拆装式的筒状结构,内芯为磁性材料的棒状结构,外套为不具有磁性的套筒结构,当磁性内芯插入不具有磁性的套筒结构内时,所述筒状结构的外侧面产生磁力;将所述含有磁性内芯的套筒状磁分离结构放入含有所述核酸-磁珠复合物的液体的试管内,摇动,所述套筒状磁分离结构外侧通过磁力吸附所述核酸-磁珠复合物,形成所述核酸-磁珠复合物在套筒状磁分离结构外周聚集的核酸-磁珠聚集结构;将所述核酸-磁珠聚集结构从试管中取出,放入含有清洗液的试管中,摇振混悬,所述核酸-磁珠聚集结构在清洗液内进行聚集状态的原位清洗;2所述核酸-磁珠复合物经制备提取后不经过核酸洗脱过程,将清洗后的所述核酸-磁珠聚集结构从试管中取出,放入含有核酸扩增反应液的试管中,移除所述套筒状磁分离结构的磁性内芯,摇振,所述核酸-磁珠复合物从所述套筒状磁分离结构的非磁性外套的外周壁上脱落,进入所述核酸扩增反应液内;3将所述套筒状磁分离结构的外套从含有核酸扩增反应液的试管中移除并盖上试管盖,移置于核酸扩增仪上进行核酸扩增反应,形成核酸扩增反应物;4形成的所述核酸扩增反应物采用目测检测进行结果判读,所述目测检测为通过肉眼可分辩的检测方法。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 广西壮族自治区药用植物园 以磁珠作为待检物载体的核酸扩增检测方法及其应用
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