申请/专利权人：北京林业大学

申请日：2024-01-12

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117554536B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.13#公开

摘要：本发明公开了一种环境水样中15种甲状腺激素的同时分析方法，本发明首次提出利用强疏水性硅胶基质C18吸附剂增强反相保留甲状腺激素碘取代苯环疏水结构，保证不同碘取代程度和脱酸脱氨分析物同时充分保留，从而提高固相萃取富集浓缩回收率，结合超高效液相色谱‑质谱联用技术（UPLC‑MSMS）色谱有效分离和质谱正负离子电离模式同时使用，实现环境水样中15种不同酸碱性、碘取代个数和空间结构甲状腺激素的高灵敏同时检测。本发明通过对方法学验证，线性、准确度、精密度均满足要求，可用于环境水样中多种不同结构痕量甲状腺激素的同时分析。

主权项：1.一种环境水样中15种甲状腺激素的同时分析方法，其特征在于，包括如下步骤：S1样品前处理取环境水样，利用强疏水性硅胶基质吸附剂SEP-PakC18固相萃取柱，500mg,6cc,Waters，富集环境样品，首先用6mL二氯甲烷、6mL甲醇及12mL超纯水活化，过滤后的水样中添加5ng同位素内标，将水样以5-10mLmin的流速通过，用10mL超纯水淋洗并吹干；最后用6mL甲醇洗脱、氮气吹干，用甲醇复溶至200µL，进入仪器进行分析；S2超高效液相色谱串联质谱检测质谱分析条件：采用电喷雾离子源ESI，四碘甲状腺乙酸、三碘甲状腺乙酸和二碘甲状腺乙酸为负离子检测，其他甲状腺激素为正离子检测；质谱检测采用多反应监测模式MRM，毛细管电压3kV；脱溶剂气温度600°C；离子源温度150°C；脱溶剂气体流量900LHr；碰撞气流量0.15mLmin；四碘甲状腺乙酸、三碘甲状腺乙酸和二碘甲状腺乙酸在ESI-MSMS在负离子模式下运行，选取的平均参数为：毛细管电压2.5kV；脱溶剂气温度200°C；离子源温度150°C；脱溶剂气体流量800LHr；碰撞气流量0.15mLmin；UPLC液相条件：色谱柱选择HPH-C18色谱柱，有机相选择甲醇，水相对比纯水和0.1%乙酸水溶液条件下15种甲状腺激素的色谱分离效果及质谱响应灵敏度，确定选择0.1%乙酸水溶液；最终流动相采用B:甲醇，A：0.1%乙酸水溶液，梯度条件为：0min，90%A；0-3min，90%A；3-6min，90%-50%A；6-10min，50-10%A；10-10.5min，10%-0%A；10.5-12min，0%A；12-12.1min，0%-90%A；12.1-16min，90%A；经过对比不同流速下的柱压、峰宽、物质洗脱情况，最终流速为0.3mLmin；柱温为35°C，进样量为2μL；所述15种甲状腺激素为：四碘甲状腺原氨酸、3,3′,5-三碘甲状腺原氨酸、3,3′,5′-三碘甲状腺氨酸、3,3′-二碘甲状腺氨酸、3,5-二碘-L-甲状腺氨酸、一碘酪氨酸、二碘酪氨酸、甲状腺氨酸、3-碘-L-甲状腺氨酸、3′-碘-L-甲状腺氨酸、3,5-二碘甲状腺乙胺、3-碘甲状腺乙胺、四碘甲状腺乙酸、三碘甲状腺乙酸、二碘甲状腺乙酸。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京林业大学 一种环境水样中15种甲状腺激素的同时分析方法

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