申请/专利权人：中国科学院地理科学与资源研究所

申请日：2023-02-03

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN116297758B

主分类号：G01N27/327

分类号：G01N27/327;G01N27/48

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2023.07.11#实质审查的生效;2023.06.23#公开

摘要：本发明公开了高灵敏识别的电化学DNA传感器及其应用，属于电化学分析技术领域；该电化学DNA传感器包括固态电极和修饰于固态电极表面的hairpinDNA膜。本发明通过构建电化学DNA传感器，可提升检测灵敏度、降低检测成本、提升传感器的适用性。

主权项：1.高灵敏识别的电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1对电极进行活化处理，得到活化的固态电极；2将hairpinDNA制备成溶液，得到hairpinDNA溶液；3将hairpinDNA溶液涂于固态电极表面，交联孵育后淋洗、吹干，得到电化学DNA传感器；步骤1中，活化处理包括金电极活化：将金电极置于浓硫酸和H2O2的混合，体积比VV＝7:3的溶液中处理5min，用超纯水淋洗后30s，然后放入浓硝酸中浸泡2min，取出后再次用超纯水淋洗，氮气吹干，得到活化金电极；步骤2中，HairpinDNA溶液的制备：所述HairpinDNA为hairpinDNA-2；将单链hairpinDNA-2粉末溶解于50mMpH7.5的Tris-NaCl缓冲液中，用漩涡振荡器混匀，并置于88℃的水浴锅中热活化处理5min，然后自然冷却至室温，得到DNA溶液，10μM，备用；DNA-2核苷酸序列如SEQIDNO.2：5’-TTTTTTTTTTCACTCTTTGAGGCGGGTGGGTGGAGTG-3’，HO-CH26-S-S-CH26基团修饰于5'端第1个T碱基，用于链接活化金电极界面，STEM部分碱基数为5对，loop部分碱基数为17；步骤3中，交联所用交联剂为1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N’-二环己基碳二亚胺、羟基苯并三唑、4-二甲氨基吡啶、1-羟基苯并三氮唑、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、三2-羧乙基膦盐酸盐、β-巯基乙醇、二硫苏糖醇中的一种或几种；交联剂浓度为1-50μM；所述交联剂孵育时间为10-120min；所述DNA孵育时间为2～48h。

全文数据：

权利要求：

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