申请/专利权人：内蒙古奕宏医学研究有限公司

申请日：2024-01-18

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117582402B

主分类号：A61K9/06

分类号：A61K9/06;A61K35/15;A61K31/164;A61K35/74;A61K36/31;A61K31/4172;A61K31/727;A61K31/4166;A61K47/32;A61K47/10;A61P31/22;A61P25/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2024.03.12#实质审查的生效;2024.02.23#公开

摘要：本发明提供了一种含白细胞提取物的凝胶及其制备方法和应用。所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计包括以下组分：白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、保湿剂1~15%、凝胶基质0.5~2.5%、络合剂0.01~0.05%，余量为条件培养液。本发明含白细胞提取物的凝胶不含药物成分，配方简单，对于带状疱疹后遗痛的疗效十分显著，无复发现象；且本发明所述凝胶对皮肤没有任何损伤，致敏性极低。

主权项：1.一种含白细胞提取物的凝胶，其特征在于，所述含白细胞提取物的凝胶的制备原料按质量百分含量计包括以下组分：白细胞提取物1~10%、泛醇1~5%、明串球菌萝卜根发酵产物滤液0.5~2.5%、肌肽0.5~2%、天然类肝素0.1~0.5%、尿囊素0.05~0.2%、保湿剂1~15%、凝胶基质0.5~2.5%、络合剂0.01~0.05%，余量为条件培养液；所述白细胞提取物的制备方法包括以下步骤：（1）采集：采集产后马或驴脐带血；（2）分离：对脐带血进行离心处理，得到白细胞层上清液；其中，所述分离中离心处理的参数为：离心力为300~600g，离心的时间为10~20min；且所述白细胞层上清液需在-85℃～-75℃的温度条件下冷冻保存；（3）病毒检测：对白细胞层上清液进行RT-PCR荧光和或PCR荧光定量检测病毒；其中，所述病毒包括甲1型马流行性感冒病毒、2型马流行性感冒病毒、马传染性贫血病毒、马疱疹病毒、马动脉炎病毒、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒、东西部马脑髓炎病毒、口蹄疫病毒和非洲马瘟病毒；（4）微生物检测：对白细胞层上清液进行内毒素和细菌培养检测微生物；其中，所述内毒素检测采用内毒素鲎试法；所述细菌培养检测采用琼脂平板培养法；（5）提取：对病毒检测和微生物检测合格的白细胞层上清液进行离心处理，提取得到白细胞提取物；其中，所述合格的白细胞层上清液的标准为：PCR检测均为阴性，内毒素检测低于0.125EUmL，细菌检测无检出；所述提取中离心处理的参数为：离心力为4500~5500g，离心的时间为25~30min；所述离心处理上清液需依次经过0.45μm和0.1μm的滤膜进行过滤；所述白细胞提取物需在-85℃～-75℃的温度条件下冷冻保存；所述凝胶基质为卡波姆；所述条件培养液由间充质细胞在含有白细胞提取物的培养液中培养得到；其中，所述培养液选自DMEMF12培养基、DMEM培养基、α-MEM培养基或MSCSFM培养基中的任意一种；其中，所述白细胞提取物在培养液中的添加量为5~15wt%；所述条件培养液由以下步骤制备得到：（a）将白细胞提取物和培养液混合，得到含有白细胞提取物的培养液；（b）将脐带间充质干细胞和含有白细胞提取物的培养液混合，进行离心处理后，弃去上清液，得到重悬细胞；再将重悬细胞置于含有白细胞提取物的培养液中，进行培养；（c）待细胞生长至70~80%汇合度，收集上清液并进行离心处理，得到条件培养液。

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