申请/专利权人：中国科学院生物物理研究所

申请日：2023-11-28

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117305365B

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;C12N15/866;C12N15/65;C12Q1/06;G01N21/64;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2024.01.16#实质审查的生效;2023.12.29#公开

摘要：本发明公开了昆虫细胞—哺乳动物细胞表达穿梭载体SmartBM‑1及其应用。该载体的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。实验证明，本发明提供的载体可以同时在昆虫细胞和哺乳动物细胞中进行高效蛋白表达，极大的提高了实验效率；同时，该载体中的目的蛋白与可切割的sfGFP‑TS蛋白融合表达，sfGFP‑TS蛋白指示目的蛋白的表达状况，便于实验人员在培养早期了解细胞表达情况、评估表达水平以及提前终止有问题的实验，从而节省物力和人力，进而节约实验成本。本发明提供的载体具有重要的应用价值。

主权项：1.载体SmartBM-1，包括融合启动子、目的蛋白表达区、使哺乳动物细胞中蛋白的表达增加的元件、终止序列、与杆状病毒进行重组的元件和抗性基因表达盒；所述融合启动子在昆虫细胞和哺乳动物细胞中高效启动蛋白表达；所述目的蛋白表达区自5’末端起依次包括如下元件：多克隆位点、HRV-3C-蛋白酶的酶切位点和荧光蛋白基因；所述多克隆位点中具有一个以上酶切识别序列；所述融合启动子自5’末端起依次由人源CMV启动子、白斑综合征病毒IE1启动子和p10启动子组成；所述人源CMV启动子的核苷酸序列如SEQIDNO：1自5’末端起第2005-2892位所示；所述白斑综合征病毒IE1启动子的核苷酸序列如SEQIDNO：1自5’末端起第2899-3055位所示；所述p10启动子的核苷酸序列如SEQIDNO：1自5’末端起第3062-3175位所示。

全文数据：

权利要求：

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