申请/专利权人：广西壮族自治区食品药品检验所

申请日：2023-12-21

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737269A

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/01

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明涉及致病菌鉴定技术领域，具体涉及一种乳酶生片生产菌种的分子鉴定方法。本发明提供的一种乳酶生片生产菌种的分子鉴定方法，包括一对扩增引物的设计合成；通过DNA提取、PCR扩增、酶切反应以及产物鉴定。本发明所提供的一种乳酶生片生产菌种的分子鉴定方法，仅编号为140623CMCCB32901乳酶生片生产菌种的基因组PCR产物能被BglII内切酶切开，其余菌种均无法被切开，具有很强的专属性和准确性。

主权项：1.一种乳酶生片生产菌种的分子鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：扩增引物的设计合成；S2：DNA的提取：提取乳酶生片生产菌种的基因组DNA；S3：PCR扩增：将S2提取得到的菌株DNA，按照PCR扩增反应总体系为25μL，PCRMasterMix12.5μL、扩增引物的上游引物10μM1.0μL、扩增引物的下游引物10μM1.0μL、DNA模板50.0μg，补足ddH2O至25μL，进行PCR扩增反应；S4：酶切反应：以S3所得到的PCR扩增产物为模板，进行酶切反应；酶切反应总体系为3.0μL，其中PCR产物2.0μL、BglII内切酶0.5μL、r3.1buffer0.3μL、补足ddH2O至3.0μL；S5：产物鉴定：PCR产物及酶切产物经2％琼脂糖凝胶电泳鉴定。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广西壮族自治区食品药品检验所 一种乳酶生片生产菌种的分子鉴定方法

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