申请/专利权人：河南省农业科学院;神农种业实验室

申请日：2023-12-23

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737187A

主分类号：C12Q1/18

分类号：C12Q1/18;C12R1/645

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明涉及一种基于生根离体叶片的花生网斑病室内接种鉴定方法，通过离体叶片取样、植物激素处理及温室培养使离体叶片生根，再通过室内接种网斑病病原菌分生孢子悬浊液，以及叶片扫描及病斑面积分析，进行花生材料的网斑病抗性评价。本发明基于离体叶片生根和不影响植株正常生长发育的条件下，实现室内环境条件下对稀缺材料的网斑病接种及抗性鉴定，提高了优异种质网斑病抗性的鉴定效率。叶片生根后可以利用根尖分析材料的染色体组成鉴定材料身份；另一方面生根的叶片具备生命功能，提高了抗性鉴定的准确性。本发明方法操作简单高效，能对单个或少数珍稀花生材料进行网斑病抗性评价，有效缩短抗病育种周期。

主权项：1.一种基于生根离体叶片的花生网斑病室内接种鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1花生离体叶片培养与生根诱导：从生长良好的花生植株上剪取健康且无损伤的顶端倒数第三片展开叶片，置于生根溶液中浸泡6h，将浸泡过的叶片插入装满蛭石的营养钵中，浇灌营养液后用塑料薄膜覆盖，保湿培养出根；2花生种间杂交后代材料的细胞学鉴定：剪取新鲜根尖用于染色体制片，然后以染色体特异的寡核苷酸库为探针对种间杂种或附加系材料进行荧光原位杂交鉴定；3孢子悬浊液的接种：接种前向网斑病病原菌的分生孢子悬浊液中加入吐温20，使吐温20的终浓度为1％vv，然后将分生孢子液均匀地喷洒到叶片上，在25℃-28℃条件下薄膜覆盖保湿培养20天，分生孢子液悬浊液的接种浓度为2×106～2.5×106个mL；4花生离体叶片的网斑病抗性鉴定。

全文数据：

权利要求：

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