申请/专利权人:南通市第一人民医院
申请日:2023-12-27
公开(公告)日:2024-03-22
公开(公告)号:CN117737212A
主分类号:C12Q1/6858
分类号:C12Q1/6858;C12Q1/6827;C12N15/11
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开
摘要:本发明公开了一种恒温单管检测单碱基变异的方法及其检测试剂盒。本发明通过将恒温扩增与酶切反应结合,利用酶切反应的特异性,实现了单碱基的检测分辨率,其中与靶标结合的检测探针设计了标签序列,通过标签序列与信号报告探针的杂交进一步将识别到的靶标信息转换为信号报告探针输出的信号,达到了信号报告探针通用的目的,节约了检测方法的试剂成本。因此,与现有的恒温检测方法相比,本方法具有操作简便、检测灵敏度高、特异性好、信号报告探针通用等优势,能够实现单管对单碱基差异靶标的低成本恒温检测。
主权项:1.一种恒温单管检测单碱基变异的方法,其特征在于,所述方法为偶联等温扩增和等温酶切反应的方法,具体包括以下步骤:在单管中配制包括LAMP扩增引物、带有标签序列1的野生型靶标的下游检测探针,带有标签序列2的突变型靶标的下游检测探针,匹配签序列1的信号报告探针1、匹配签序列2的信号报告探针2、聚合酶和核酸酶的反应体系,加入待检测样本后,在恒定温度下进行反应,通过生成的报告信号判断具体的检测靶标,所述的带有标签序列1野生型靶标的下游检测探针1和带有标签序列2的突变型靶标的下游检测探针2是针对靶标在扩增过程中大量形成的中间体区域特异性设计得到。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南通市第一人民医院 一种恒温单管检测单碱基变异的方法及其检测试剂盒
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