申请/专利权人:天津市农业科学院
申请日:2022-06-14
公开(公告)日:2024-03-22
公开(公告)号:CN115433686B
主分类号:C12N1/19
分类号:C12N1/19;C12N15/81;C12N15/12;A61K38/17;A61P31/04;C12R1/84
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.22#授权;2022.12.23#实质审查的生效;2022.12.06#公开
摘要:本发明公开了死亡素和斑点叉尾鮰β‑防御素基因重组毕赤酵母的构建及抗菌活性研究。试验将死亡素和防御素经酵母偏好密码子优化后构建共表达TD基因至载体pPICZαA上,PCR、双酶切和测序筛选后经SacI线性化,电转化至酵母表达菌株GS115中,Zeocin抗性、PCR筛选获得重组高抗阳性转化工程菌株GS115‑pPICZαA‑TD(Mut+),用0.5%甲醇诱导目的蛋白的表达,96h后收集培养基上清冻干浓缩并纯化,进行体外抑菌试验、溶血性试验及细胞毒性试验。结果表明,本试验成功获得重组毕赤酵母且表达出广谱高效抑菌、安全性高的重组抗菌蛋白,为临床预防和治疗细菌性疾病提供治疗思路和实验依据。
主权项:1.一种共表达死亡素thanatin基因和斑点叉尾鮰β-防御素基因defbl的重组毕赤酵母表达菌株GS115-pPICZαA-TD;所述重组毕赤酵母表达菌株GS115-pPICZαA-TD以毕赤酵母GS115为出发菌株并含有TD基因,所述TD基因的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示。
全文数据:
权利要求:
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