申请/专利权人:江苏省淡水水产研究所
申请日:2020-11-11
公开(公告)日:2024-03-26
公开(公告)号:CN112342214B
主分类号:C12N15/113
分类号:C12N15/113;C12N15/70
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.26#授权;2021.03.02#实质审查的生效;2021.02.09#公开
摘要:本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法,通过设计CRISPR序列,制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接,再通过体外转录方法制备sgRNA,将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵,以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列,特异性强且敲除效率高,敲除流程简单快捷,为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。
主权项:1.用于靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的核苷酸,其特征在于:包括,sgRNA序列如序列SEQIDNO.27中所示;用体外转录方法制备所述sgRNA时,使用的正向引物序列如SEQIDNO.18所示,反向引物序列如SEQIDNO.20所示;CRISPR序列如序列SEQIDNO.7所示,所述CRISPR序列位于zbtb38基因外显子393bp之前。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 江苏省淡水水产研究所 一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。