申请/专利权人：四川省肿瘤医院

申请日：2020-10-29

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN112461716B

主分类号：G01N15/00

分类号：G01N15/00;G01N15/0205;G01N21/31;G01N21/33;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74;G01N33/50;C12Q1/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2021.03.26#实质审查的生效;2021.03.09#公开

摘要：本明公开了一种大黄素联合索拉非尼的纳米制剂对HepG2增殖的抑制验证方法，包括以下步骤：S1、配置标准溶液；S2、对上述标准溶液进行波长扫描；S3、根据扫描确定大黄素的检测波长，测定不同浓度大黄素标准溶液的吸光度值，根据吸光度值对标准溶液进行线性回归，建立标准曲线；S4、对索拉非尼溶液、大黄素联合索拉非尼溶液进行专属性考察；S5、测定不同浓度索拉非尼标准溶液中索拉非尼的含量，建立标准曲线；S6、制备大黄素联合索拉非尼的纳米粒；S7、大黄素联合索拉非尼纳米粒的质量评价，包括外观、粒径、电位、包封率和载药量；S8、考察大黄素联合索拉非尼纳米制剂在抑制HepG2细胞增殖中的作用。

主权项：1.一种大黄素联合索拉非尼的纳米制剂对HepG2增殖的抑制验证方法，其特征在于，包括以下步骤；S1、配置标准溶液，其中标准溶液包括：大黄素溶液、索拉非尼溶液和大黄素混合索拉非尼溶液；S2、对上述标准溶液进行波长扫描，以甲醇溶液为空白对照在190～600nm波长范围内使用紫外分光光度计对标准溶液分别进行波长扫描；S3、根据扫描确定大黄素的检测波长，测定不同浓度大黄素标准溶液的吸光度值，根据吸光度值对标准溶液进行线性回归，建立标准曲线；精密称取大黄素储备液0.4、0.8、1.0、1.4、1.6mL置10mL容量瓶中，甲醇溶液定容配成浓度为4、8、10、14、16μgmL的系列标准溶液，以甲醇溶液为空白对照在480nm波长下测定各吸光度值；S4、对索拉非尼溶液、大黄素联合索拉非尼溶液进行专属性色谱图考察；S5、测定不同浓度索拉非尼标准溶液中索拉非尼的含量，建立标准曲线；S6、制备大黄素联合索拉非尼的纳米粒；称取适量大黄素和索拉非尼与载体材料，加入二氯甲烷-丙酮溶液1.2mL，索拉非尼和大黄素与载体材料完全溶解后，加入2mL1%PVA溶液,探头超声1min，再加入3mLPVA溶液，探头超声1min后，转移到茄形瓶中；于37℃水浴条件下旋蒸15min以除去有机溶剂，得到Emo@Sora-NPs胶体溶液，用超纯水定容至5mL后转移至离心管内于4℃避光条件下保存；S7、大黄素联合索拉非尼纳米粒的质量评价，包括外观、粒径、电位、包封率和载药量；S8、考察大黄素联合索拉非尼纳米制剂在抑制HepG2细胞增殖中的作用；采用MTT法进行细胞活性检测，并计算细胞的存活率；其中，细胞存活率计算公式如下：细胞存活率＝[实验组OD值-空白组OD值][对照组OD值-空白组OD值]×100％。

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