申请/专利权人:北京嘉士腾医学检验实验室有限公司
申请日:2023-12-25
公开(公告)日:2024-03-26
公开(公告)号:CN117757720A
主分类号:C12N5/071
分类号:C12N5/071
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开
摘要:本发明公开了一种高效构建兔源肝脏类器官的培养基及方法。包括将新鲜的兔源肝脏组织,使用PBS清洗后,切碎;向组织碎片中加入组织消化液消化,经多次短时消化,收集上悬液与细胞组织沉淀;离心收集消化后的细胞组织沉淀;将组织细胞接种至预制的基质胶顶部On‑top,使用兔源肝脏类器官培养基进行培养;2天后转至胶滴中包埋培养悬浮法,培养过程中增加On‑top这一步,从取材到类器官培养传代,时间约为7天,而常规包埋法基本在14‑20天,缩短了培养周期。本发明兔源肝脏类器官培养的成功率均在95%以上,较市场其它动物源肝脏类器官70%的培养成功率,明显得到了提高,并加快原代培养中类器官的生长速度。
主权项:1.一种高效构建兔源肝脏类器官的培养基,其特征在于,包括以下组分:Wnt3a条件培养基、R-spondin1条件培养基、Noggin、HEPES、1×GlutaMax、penicillinstreptomycin、N2细胞培养添加剂、B27细胞培养添加剂、MEM非必需氨基酸溶液NEAA、nicotinamide、N-acetylcystein、A8301、humanEGF、humanHGF、humanFGF10、Gastrin1、Forskolin、含有Y27632的advanceDMEMF12。
全文数据:
权利要求:
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