申请/专利权人：北京基石生命科技有限公司

申请日：2023-12-18

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN117757747A

主分类号：C12N5/09

分类号：C12N5/09;C12Q1/02

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开

摘要：本发明公开了一种在体外模拟腹腔热灌注化疗药物作用的方法。本发明属于医药技术领域，具体涉及一种在体外模拟腹腔热灌注化疗药物作用的方法。本发明的构建腹膜肿瘤的微肿瘤模型的方法，包括如下步骤：a1用样本解离液对腹膜肿瘤实体瘤组织进行解离处理；a2利用培养基悬浮培养步骤a1解离出来的单细胞，形成细胞团，即得腹膜肿瘤的微肿瘤模型。通过采用本发明的方法得到的腹膜肿瘤的微肿瘤模型可以模拟腹腔热灌注化疗过程，精准预测热灌注化疗药物效果，具有广泛的应用前景。

主权项：1.一种构建腹膜肿瘤的微肿瘤模型的方法，包括如下步骤：a1用样本解离液对腹膜肿瘤实体瘤组织进行解离处理；a2利用培养基悬浮培养步骤a1解离出来的单细胞，形成细胞团，即得腹膜肿瘤的微肿瘤模型；a1中所述样本解离液为由胶原酶I、胶原酶II、胶原酶IV、EDTA溶液和PBS组成；a2中所述培养基由抗菌抗真菌剂三抗、HEPES、GlutaMax、非必需氨基酸溶液、人重组蛋白EGF、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白HGF、人重组蛋白FGF-10、人重组蛋白Wnt-3a、人重组蛋白Noggin、人重组蛋白R-spondin、人重组蛋白IL-2、人重组蛋白IL-15、CHIR99021、SB202190、A83-01、Primocin、N-乙酰-L-半胱氨酸、烟碱、N2supplement、霍乱毒素、B27、ITS-X、Y-27632、胃泌素和AdvancedDMEMF12培养基组成；其中所述抗菌抗真菌剂三抗中的青霉素的终浓度为100-200UmL、链霉素的终浓度为100-200μgmL、所两性霉素B的终浓度为200-250ngmL；所述HEPES的终浓度为8-12mM；所述GlutaMax的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述非必需氨基酸溶液的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述人重组蛋白EGF的终浓度为10-100ngmL；所述人重组蛋白bFGF的终浓度为10-50ngmL；所述人重组蛋白HGF的终浓度为5-25ngmL；所述人重组蛋白FGF-10的终浓度为5-25ngmL；所述人重组蛋白Wnt-3a的终浓度为200-300ngmL；所述人重组蛋白Noggin的终浓度为100-200ngmL；所述人重组蛋白R-spondin的终浓度为250-500ngmL；所述人重组蛋白IL-2的终浓度为10-100ngmL；所述人重组蛋白IL-15的终浓度为10-100ngmL；所述CHIR99021的终浓度为1.5-6μM；所述SB202190的终浓度为5-10μM；所述A83-01的终浓度为0.25-1.25μM；所述Primocin的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述N-乙酰-L-半胱氨酸的终浓度为0.5-2mM；所述烟碱的终浓度为5-10mM；所述N2supplement的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述霍乱毒素的终浓度为0.1-1nM；所述B27的终浓度为1.5-2.5％体积百分含量；所述ITS-X的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述Y-27632的终浓度为5-20μM；所述胃泌素的终浓度为5-20nM；余量均为AdvancedDMEMF12培养基。

全文数据：

权利要求：

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