申请/专利权人：嘉兴市农业科学研究院

申请日：2022-02-28

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN114657172B

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.26#授权;2022.07.12#实质审查的生效;2022.06.24#公开

摘要：本发明公开了一种从少量稻米中提取基因组DNA的方法及应用，属于农业生物技术领域。本发明提供的方法，其提取的主要对象为少量稻米及稻米部分组织；本发明采取了一系列针对性的实验步骤，能有效地破碎组织、去除淀粉、充分裂解细胞，从而获得浓度纯度较高的基因组DNA。利用本发明提供的方法从稻米中提取基因组DNA，能满足大部分PCR技术的需要，可用于稻米品种真实性鉴定，还可用于水稻基因功能分析。利用本发明稻米基因组DNA提取方法，能从少量稻米中获得基因组DNA，与以水稻幼苗为对象的种子发芽提取DNA方法相比，取材极为方便，不受种子发芽失败影响，可大大减少实验准备的时间。

主权项：1.一种从少量稻米中提取基因组DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将13-6粒稻米浸泡在淀粉酶溶液中，浸泡至稻米吸胀；（2）将步骤（1）中吸胀后的稻米研磨成浆，60-75℃浸泡后，离心，获得离心沉淀物1；（3）向步骤（2）中的离心沉淀物1中加入提取液，60-75℃浸泡后离心，获得离心上清液；（4）向步骤（3）中的离心上清液中加入等体积的异丙醇，混匀后离心，获得离心沉淀物2；（5）使用体积比为75%乙醇溶液洗涤步骤（4）中的离心沉淀物2后，弃去上清液，干燥沉淀，于保存液中溶解，获得稻米基因组DNA；步骤（1）中所述的淀粉酶溶液成分为：100mMNaAc，100mMNaCl，0.3mMCaCl2，体积比为0.5%的TritonX-100和100mgLα-淀粉酶；所述的淀粉酶溶液的pH为5.5，步骤（1）中淀粉酶溶液的加入量为300-1500μL；步骤（3）中提取液的加入量为300-1000μL；步骤（3）中所述提取液成分为：100mMTris，20mMEDTA和1MKCl；所述提取液的pH为8.3。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 嘉兴市农业科学研究院 一种从少量稻米中提取基因组DNA的方法及应用

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