申请/专利权人：北京化工大学

申请日：2022-04-25

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN115044573B

主分类号：C12N9/88

分类号：C12N9/88;C12N1/21;C12N1/19;C12P7/44;C12R1/19;C12R1/865;C12R1/15

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.26#授权;2022.09.30#实质审查的生效;2022.09.13#公开

摘要：本发明涉及一种2‑羟基对苯二甲酸的生物合成途径，其包括1以五碳糖和或六碳糖为碳源，生成中间体莽草酸，再在3‑羟基苯甲酸合酶的催化作用下生成3‑羟基苯甲酸；2在脱羧酶的作用下对3‑羟基苯甲酸的羟基邻位进行羧化，合成2‑羟基对苯二甲酸；所述脱羧酶为芳香酸脱羧酶或芳香酸脱羧酶突变体。本发明还涉及基于上述生物合成途径的2‑羟基对苯二甲酸的生物合成方法，研究结果表明，采用本发明方法生物法生产2‑羟基对苯二甲酸切实可行，为生物基2‑羟基对苯二甲酸替代石油基对苯二甲酸奠定基础。生物合成法生产2‑羟基对苯二甲酸及其中间物具有污染小，反应条件温和，反应特异性高，产品易于分离纯化等优点，极具发展前景。

主权项：1.一种芳香酸脱羧酶突变体，其由芳香酸脱羧酶突变获得，所述芳香酸脱羧酶为来源于米曲霉的2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao，其氨基酸序列如SEDNO：4所示；所述芳香酸脱羧酶突变体为来源于米曲霉的2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的突变体；2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶的突变体为：2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的氨基酸序列的第62位氨基酸突变为缬氨酸V，记为突变体2,3-DHBD-Ao-62V，其氨基酸序列如SEDNO：5所示；2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的氨基酸序列的第62位氨基酸突变为丙氨酸A，记为突变体2,3-DHBD-Ao-62A，其氨基酸序列如SEDNO：6所示；2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的氨基酸序列的第62位氨基酸突变为甘氨酸G，记为突变体2,3-DHBD-Ao-62G，其氨基酸序列如SEDNO：7所示；2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的氨基酸序列的第27位氨基酸突变为甘氨酸，记为突变体2,3-DHBD-Ao-27G，其氨基酸序列如SEDNO：8所示；2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD_Ao的氨基酸序列的第27位氨基酸突变为甘氨酸，第62位氨基酸突变为丙氨酸A，记为突变体2,3-DHBD-Ao-27G+62A，其氨基酸序列如SEDNO：10所示。

全文数据：

权利要求：

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